柴胡皂甙-d防治大鼠系膜增生性肾小球肾炎地研究.pdfVIP

事i鹰画零尹西莲彗夸荦牲璃套搜专趱群僮汇鳊 ·65 柴胡皂甙一d防治大鼠系膜增生性肾小球肾炎的研究 中日友好医院(北京100029)李平 中药柴苓汤用于治疗 量。 肾小球疾病。临床报道其 4免疫荧光分析 肾组织在被冷却为一70℃ 对于肾病综合征和儿童 保存，冰冻切片机将冻结组织切割为4m厚，间接 IgA肾病有疗敢。实验研 免疫荧光法染色。染色使用的一抗有：抗Ⅱ)1单克 究提示，柴苓汤对不同动 隆抗体(n山)；抗O)(8和∞蛐；抗 物模型的肾小球肾炎均具 11tPⅦmAb(该抗体识别的抗原为被活化的巨噬细 有治疗作用，但是有关药 胞)；抗a一野似mAb；多克隆兔抗TGF—B抗体和兔 理学的作用基础还没有完 抗胶原l抗体。二抗为F11℃标记羊小鼠IgGl和 全搞清楚。最近我们证实 IgG2a；FI’rc标记猪抗兔Igs。分别记数每只大鼠20 了柴苓汤对单克隆抗体l 个完整的肾小球中和肾小球周围EDl一，TRPM3 一22～3引起的肾小璩肾炎具有抑制作用，其中主 一．0船一和蚴一阳性细胞数；在放大400倍的 要活性成分是柴胡皂甙一d，在此基础上我们进一步 情况下，记数每只大鼠15个视野中肾小管间质EDl 分析了柴胡皂甙一d可能的作用机理。 一，n㈣一，0Ⅻ一和∞8一阳性细胞数。另 外，半定量分析了肾小球内1、GF一日、I型胶原和a一 材料与方法 蚍的表达。根据荧光强度和在肾小球内的分布． L实验设计18只大鼠分为3组，每组6只。进行半定量计算(1+，25％．2+．25—50％．3+， 组l给生理盐水(PBS)作对照；组2给柴胡皂甙一d50+75％，75％)。 O 6 Ing硷斤体重／d；全部大鼠于左肾切除一天后， 5反转录多聚酶链反应(RT—PcR)利用 尾静脉注射500徽克单克隆抗体l一22—3。单克 RT—PcR方法．检验了肾小球内11sF一3和l型胶 隆抗体1—22—3注射后第1、4、8、14和21天，大鼠原的表达。并进行了半定量分析。 在代谢笼内收集24小时尿液。每组大鼠在抗体注 6血生化检查检测了血液标本中血清总蛋 射前5天。开始给生理盐水或柴胡皂甙一d直到抗 白、肌酐、胆固醇和尿素氟的水平。 体注射2l天后处死全部大鼠，心脏取血做生化鼍 7统计学分析分折数据、处理结果采用非配 查，分离肾小球提取RNA，取肾组织做免疫荧光和 对t检验，当P0．05时，考虑有统计学意义。所有 光学显馓镜检查。 数据均采用均值±s．d表示。 2血压测定血压的测定采用尾动脉描记法， 结 果 测定前大约预热15分钟，使尾部血管充分扩张。单 l蛋白尿给一侧肾切除的大鼠注射单克隆 克隆抗体1—22—3注射后第1、5、10、14和18天， 晚7～10时之间测定全部大鼠的血压，重复三次，取 抗体1—22—3后出现蛋白尿，屎蛋白可从抗体注射 平均值。 4天后持续到实验结束。与生理盐水对照组比较， 3光镜检查部分肾组织被固定在10％的中 治疗组于第4、8、14和21天均显示对屎蛋白具有抑 性福尔马林缓冲液中，石蜡包埋。切割2—3岬厚， 制作用，特别是在第4天，柴胡皂甙一d18咄／kg．d 与生理