长春地区RhDel表型及基因的探讨.pdfVIP

长春地区RhDel表型及基因的探讨 于晓丽 焦立新 吉林省血液中心 摘要 目的研究长春地区献血者Del表型及基因型特征。方法181名经抗人球方法确认的RhD阴 出率约占24．3％，f检验得出长春与深圳、香港、台湾、海南、云南地区的Del表型血液所 占阴性血液的比率没有显著差异(PO．05)，与上海、新疆、日本地区相比有显著差异(P 的阳性率没有显著差异(P0．05)。结论PCR．SSP方法是一种检测Del表型的有效方法。 吸收放散试验和PCR-SSP方法结合检测RhD血型，有助于避免假阳性和假阴性。 关键词：等位基因Del表型Rh血型PcR-SSP Rh血犁系统=|}常复杂，在临床输血过程中重要性仅次子ABO血型系统。RhD是Rh血型系统 最重要的抗原，也是引起严重的新生儿溶血病的主要红细胞抗原。Del表型在二十世纪八十年代发 现于东亚，是一种具有很微弱D抗原的血型【l】。常规间接抗人球蛋白试验(IAT)检测为阴性，只 有通过敏感的吸收放散试验才能检出【3l。目前中国人群最常见最重要的DEL等位基因是RHDl227A。 Del研究已成为热点，关于其成果会越来越多。本文主要研究长春地区Del表型频率、携带RHDl227A 等位基因情况以及探讨准确检测Del表型的方法。 1．对象与方法 1．1对象长春地区随机抽取Rh阴性献血者血样181名。 l。2血清学实验 1．2．1间接抗人球试验排除血样中的弱D和不完全D表型。 1．2．2吸收放散试验筛选Del表型 1-3基因组DNA提取 DNAIsolationKitLot：038 使用invitrogen Batch：46481，按照说明书流程操作，从全血中提取 基因组DNA。 1．4序列特异性引物PCR dNTPs，2mmol／L 生物技术有限责任公司，北京，中国)，200tamol／L M92+，DEL等位基因上、下游 引物各0．5111(10Mm)，内对照上、下游引物4p,M各加0．61．tl，模板DNA Reseaeh DNA扩增仪(DNA EngineDyad 62*(2退火l min，共35个循环。扩增产物用2％琼脂糖糖凝胶电泳检测结果。 1．5引物序列： ．．260．． 表1 FCR-SSP的引物序列 Pnmer㈣Sequence Genomic region Len@h (引物名称) (序列) (位置) (长度，bp) RHD】227As5’_GATGACCAAG丁1TrcTGGAAA-3+exoR91207．1227109 Dc]2int9 988-62 7 HGHs 5二GCC丌cCCAACCATTCCCm-3hormone429 humangrowth 7 HGH拈 57．TCACGGⅣn1℃TGTTGTGr兀℃-3human growthhormone hormone(人类生K闻子) humangrowth 2．结果 21吸收放散实验结果 在1引名Rh阴性样本中Del阳性样本为43例，DeL阴性样本为138例 Del血清学结果与其他城市地区比较 35 3