特殊性质脂肪酶产生菌的筛选和产酶条件的研究.pdfVIP

生产制备技术与制弃}研究论文 全国第六届工业生化学术会议(1999，福建)论文集 特殊性质脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件的研究 章主贤蒋咏梅施巧琴昊凇刚 (福建师范欠学生物工程学院，福州350007) 摘要：毒‘采用底物琼脂平板透明圈法， J237价土壤样品中分离碍到吗椿衅母 菌分别能较稳定地产生耐温碱性、耐温酸性、低温碱性和低温酸性的脂肪酶， 它们的 产酶培养基妇幔厦产酶条件分别为． HB40产耐温碱性脂肪晦一～豆饼粉10％，玉米 粉0．5％， 玉卜浆2．0％， (NH，)：SO。0．1％，Na：HPO。12H200．2％，MgSO， 7H20 o02％， 豆油 2．0％，麦麸1．o％，NH。NO。o 7H。O 6％，K巩PO。o．3I％，Mgs04 1．0％，pH5鼻，温度28℃，周期36h；LB315产低温碱性脂肪酶一一豆饼精2．0％， 玉米粉1．0％，矗来浆2．0％，K2HPO。。3H：OO．2％，(NH；)：S04()，2％，MgS04 7H。O 6．4，温度24℃，周期24h；LA305产低温酸性胙肪酶一～贵豆粉 0．02％，pH 1．5％，麦麸1a％， O．02％，pit5．8温度28 (NH。)，IiPO。O．4％，M醉O。。7H。O ℃，周期28h． 关键词：蛸珠性质脂肪酶，酵母菌，筛选，产酶条件 毒 脂肫酶作为一种生物催化剂， 已广泛应用于汕脂水解、珏：病浒疗、轻．1一产品脱脂、食品发 酵、添加于洗涤剂以提高去污能』J和化1．产品隹产…。然而许多工业用酶的应用范围在某些生产 工艺中因耐碱，耐墩或耐热等性能差I『ii失浠，以及工艺要求的潞度和pH不翦：酶反府的嚣适范围内 等缺陷而受到限制。 听以对具有备种特殊性质的脂肪酶酶种的研究显得越来越重婪． 对于脂肪 酶，国内在这方面的讲究还很少。 冷文设计了一·种牧为简便的筛选方法，分离得蜘四株分别能产 生耐温碱性、耐温酸f。l，低温碱性和低懿酸性脂肪酶的酵母筒， 并对填产酶的最任￡艺条件作r 初步研究． 1材料和方法 (略)。 2结果与讨论 2．1菌株筛选 通过平板分离，毅得1137株酵母荫，经摇瓶初筛和复筛，得到明株分剐能较稳定地产生耐锰 碱性脂肪酶的HB40、声耐温酸性脂肪旃的HAl003、产低温碱性脂肪酶的LB315卡丌产低温酸性 脂肪酶的LA305菌株。 2．2菌株产酶条件的优化 2．2．1油脂种类对茼株。酶的影响 327～ 生产锚备技术与制剩研究论文 全国第六届工业生化学术会议(19∞，福建}论文集 油脂是脂肪酶生产中影响很大的因素． 在摇瓶培养基中加人-定量的ji『口1、油脂进行发酵，测 定它们对慕株产酶的影响，结果见表1。 表1 不同油脂列各菌株脂肪酶形成的影响 ● 关于油瞻埘脂肪酶台娃的诱导作甩已有不少报导” 州四株菌的试验结果【表1)，HAl00 3号菌产酶与油脂种类及加量均有关， 枉-定的添加量范剐内均丧现一定棵度的诱导作用， 超过 ● 某一界限后则不同油脂的效应不同。其中10％火豆汕对其影响蛀大，酶话nl提高21．6％可见 油脂对其产酶有诱导作刷， 对于其余菌株，油脂并_小蠢现为诱导作用，在加靖较多时甚至会抑制 酶的形成。 2．2．2碳源试验 以折算纯碳量相删的碳源加人基础摇瓶培养基中． 发酵后测定酶活， 结果表明(见表2)， LB315和HB40刖JI[人t米粉虽对产酶影响小大，但明显有益丁菌