低聚果糖转移酶的分离纯化和性质研究.pdfVIP

生产制备技术与崩剜研究论吏 全国第六扁工业生化学术会议{19@9，福建)论文集 低聚果糖转移酶的分离纯化及性质研究 赵玉秀金之男 是志龙秦克尧高放栖光礼 (上海医药工业研究院，上海200040) ● cellulose， 摘要：米曲霉Aspergilluoryzae发酵液，经硫酸铵分级沉淀，DEAE G一200 凝胶过滤度羟基磷袭石吸附柱屡析等步骤， 得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的低聚朱 搪转移酶．得率44％，比活力为3513u／rag、纯化了1555倍．用SDS一聚丙烯酰胺 x 凝胶电泳测得分子量聚果糖转化酶最适pH为6．4．反应最适温度 60℃，有较好的热稳定性，低聚果糖转移酶对底物蔗糯的表观IZan值为0．65M， 关键词：低聚糖，低聚采糖转移晦，米曲霉、纯化和性质 低聚果糖， 是功能性低策糖·{·颇具代表’件的 种 又称寡果糖(Fructeoligosaccharides)， ㈦，是蔗糖分子的果精残基}：通过卢一(一2—1—1位连接l3个果精单f辽的非还原糖尽竹低 聚粜精在蔬菜，水果、蜂蜜等食l昂巾r。泛存^，fll数鼍I}二常肯限，困此在L·ILL通常采婀微7L-物 ● 2．4l JJ’蔗精底物，进iT#t子内 99)或口一呋哺果糖苷酶(p—fructofuranesidase，EC3．2．1．26)n 果糖肯转移反应而生成低聚果槠。 Auzwoba‘ oryzae， 经研究发现”‘能产生上述酶的微生物ffAspcrgillusn皤Ⅳ，Aspergillus 薛 r，iger和Asporyzae等优良产酶菌种， sidiumpullulans等蜜种微生物．找宙J筛选得到rAsp 黑曲霉(Asp．n￡ger)产生的芦一D一果锴转移酶的分离纯化及酶学性质研究将另文报道． 1材料与方法” (略)。 2结果和讨论 ■ 2．1酶的纯化 米曲霉A畔，讲^!uso彬船发酵渡通过硫酸铵分绒}ic淀，离予交换层析，凝胶过滤和轻基礴妖 石柱等分离步骤对低聚果糖转移酶蛋白逃行了纯化，分离纯化结果她表1， 从表中数据可匕【看出80％磷酸铵盐析呵以除去人部分的杂蛋白，经几次柱层析分离后，低聚 纯化后 果糖转移酶的比活力由2．26u]mgf是高N3513u／mg，酶蚩白被纯化】555倍，回收4．4％。 的低聚果糖转移酶的聚丙烯酰胺凝胶电淋结果仪呈肌匀 条带，地图1 22酶的基本性质”’ 2．2．1分子量 ——308—— 生产制备技术与制剂研