超声微泡破裂法转染Akt基因对心肌细胞缺血保护作用探究.pdfVIP

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2017-08-14 发布于安徽
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超声微泡破裂法转染Akt基因对心肌细胞缺血保护作用探究.pdf

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超声微泡破裂法转染Akt基因对心肌细胞缺血保护作用研究蒋学友李东野夏勇罗园媛陈丹潘德锋朱红徐通达张延斌徐州医学院心血管病研究所，附属医院心内科 (221000) 目的研究超声微泡破裂法转染Akt(ProteinkinaseB)基因对体外培养新生大鼠心肌细胞摸拟缺血/再灌注(ischemia/reperfusioninjury，I/R)损伤的保护作用，并观察其对（葡萄糖合成激酶-3β，GSK -3β）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteinylaspartate-specificprotease，caspase9)、B细胞淋巴瘤-2（Bcelllymphoma-2，Bcl-2）、核因子kappaBp65（Nuclearfactor-kappaBp65，NF-κBp65）、基因表达的影响，初步探讨其保护作用可能的分子机制。方法采用胰蛋白酶、 Ⅰ型胶原酶联合分次消化法分离新生Sprague-Dawley(S-D)大鼠心肌细胞，并进行体外培养。研究超声微泡破裂法转染心肌细胞，荧光倒置显微镜下观察GFP表达阳性的细胞，评价其转染效率，对不同超声参数及微泡浓度和作用时间进行优化条件选择。用优化的超声微泡法转染条件观察转染Akt后对心肌缺血的保护作用。