不同小菜蛾种群群体遗传研究.pdfVIP

318 走向2l世纪的中国昆虫学 不同小菜蛾种群的群体遗传研究+ 李碹乔传令” (中国科学科学脘动物研究所，虫鼠害综合治理国家重点实验室．北京 100080) 摘要本文应用淀粉凝腔电泳研究了武汉、河北和云南小菜蛾种群。结果发现：在取 样种群中存在高活性的n和B带酶(E!汀)，其电涑迁移率与致倦库蚊实验参考系的高活性酯 啐均不同。群体遗传学分析结果表明，三个种群的小菜蛾个体杂合子比率较高，存在刁=同程 度的遗传变异。 关t词小菜蛾杀虫药剂抗性群体遗传 昆虫体内酯酶活性的变化会直接影响对有机磷杀虫剂抗性的提高或降低，所以研究昆虫 体内酯酶的活性和形态是了解昆虫抗性高低和发展趋势的有效手段。综台多个酶位点用GE- NEPOP(v3．16)分析软件可以从群体遗传学的角度深入分析群体遗传特征及其在世代间的 连续性和群体内基因的话动规律，从而更进一步分析和预测杀虫剂抗性的发生、发展和进化 规律。 本文运用淀柑电泳的方法分析了三个小菜蛾种群在酯酶(EST)、6一磷酸葡萄糖脱氢酶 3．16) 软件分折各位点的遗传和进化特征，从而试图解释小菜蛾抗性进化的遗传规律。 1材料与方法 1．1材科 1．1．1供试小菜蛾 武汉、河北和云南种群Fh高希武教授提供。致倦库蚊，sek系，酯酶吐，胆的标准品系， 来源于美国加州野外有机磷抗性致倦库蚊种群，系法国科学院科学与进化研究所Raymond惠 赠，液氯速冻后。在一70℃冰箱中保存备用。 1．1．2供试药品 水解淀粉(Btarch acid) hyaroly捌)，法国科学院科学与进化研究所产品．苹果酸(MalJc blueRR salt)Fluka公司，辅酶I(NAD)、辅酶Ⅱ 德国Merck公司产品，固蓝RR盐(fast nitro blue，NBT)、 m舶ulfate．PMS)、氮蓝四唑(Tetrazalium (NADP)、吩嚷甲硫酸(Phena血e 毫唑蓝(Teua∞}ium 29(X}047) ·国家九五攻美项目96一OOS一协一08一oz)．虫置害练舍治理研究目索重点宴验室剖藕浑题(c ··通讯作者 药剂毒理 319 为Sigma公司产品，Tfis，加拿太Ss．ngolB有限责任公司产品，a、B一乙酸萘醋均为分析纯。 1．1．3淀粉凝胶电泳 (1) 电泳。参照Pasteur等方法。 E．C．1．1．1．37)，染色前将T乜一A缓冲液(Tried (2) 染色。胶染：苹果酸脱氢酶(MDH HCl 2ml混合放在 7．0)各2ml，Mgck(O．5M)0．3ml，NAD 0．2molt—pH8．0)，苹果酸(2M，pH lml，PMS0．3ml， 三角瓶中备用。在放有凝胶切片的染色盒中，将备用的混合液再加^NBT MTr0．5ml混合后，与10tal加热的1．5％琼脂糖混合后，快速均匀的铺盖在凝胶切片上，放在 暗处直到谱带出现。 苹果酸(ME 0．1ml混合放在三角瓶中备