56味中药乙醇提取物对酷氨酸酶活性影响和动物致色素作用的研究.pdfVIP

第四届全国中西医结合皮肤性病学术会议论文集 56昧中药乙醇提取物对酪氨酸酶活·眭影响及动物致色素作用的研究 涂彩霞 刘之力 林熙然 6011 七连玉科大学附属一院皮肤科(大墨11 任凤 ^：!医科天学生亿教研室 白癜风是色素生成障碍肚皮驮病．发病机珲尚不淌．有儿种学晚，但束完全阐明．湍疗问题有待 解决。中医治疗白癜风有丰富的经验，为此，我川从中医治疗向癜风的文献中，选出j6种常用的中药， 观察其中药乙醇提取物对蘑菇酪氨酸酶的影响和对酪氢酸酶具有较强激活作用中药的酶动力学曲线， 在此基础上进行动物致色素实验，希望从中能开发出更好的淮疗方法。 1．材料和方法 l 1 利料 t1)试剂：L一多巴、蘑菇酪氮噎酶(slgmat。品)：f：、目‘目豪r人连医蛰乖}研所提供)：其他试剂均 为市售分忻纯。 (2)仪器：UV754型分光光度计(上海第三分折仪器厂制造、。 (3)实验用中药56味：补旨妪、早莲草、曩皮、巨竹、枷横藜、0j、芍、…芎、白藓皮、当归、乌 梅、白芍、冤丝了、紫草、防矾、地畦了、苍术、桎k、 |¨、譬芝从、夜交藤、泽兰、白术、毛茨 菇、紫荆皮、桃f一、薄茹、苏经、茯苓、I|号参、独活、桑礴、熟地、苏叫、日嫫荽、蛇床子、肉梓、 潼蒺藜、黄芘、枸杞子、闩芨、人艽、黄苓、史贞于，鸡血藤、生地、夏枯草、红花、申姜、川马、 细辛、北沙参、苦参、甘草、茵陈、i。香、何首乌。 (4)实验动物：大连大学动物室提供的健康黄辕色胨鼠，体重4009左右。 l 2方法 次提取液，将乙醇提取液离心3∞Or．mlil，lOmj”．取上消，置沸戊浒中挥尽乙醇，浓缩至稠青状，月{ 1m：二甲基亚砜溶解后置4℃冰箱冻存备用，临用·，T川磷酸缓冲液稀释至设定浓度。 1jnoIL川0 (：)酪氧酸酶活}牛艇正：将中自捉取物划l 8蕊酸缓冲液{Jjml稀释后与拦菇酪氮鳗 L 酶lO。Ijlt60L。)混和．25℃孵育10mn，加入3I㈣c，lj。多巴夏应滚2m】，继续孵育2mln，立即丁分光 光度计47jnm处划光吸收值A 酸酶激活率按F列公式计算：激活率(％)=：(c—D 约一酶：C=A47j+药t酶：D=A475一药一酶。此外，另取5m舀Ⅲ1日’J补旨脂素为药物组阳性参比对照。 I’11b 5mol／L 8磷酸缓冲液稀释刮 (3)中药影响酪氦酸酶活陛的动力学删蔡：jij中；々提取物用1．+l 1∞mg．7ml，取0lml与蘑菇酪氯酸酶l。O 第四届奎国中西医结合皮肤性病学术会议论文集 用米氏公式计算Km。 (4)中药致色素实验：选出对酪氨酸酶具有激活作用的lO味中药刺蒺藜、薄荷、补骨脂、扒仁、 毛茨菇、独活、夏枯草、旱莲草、白藓皮、潼蒺藜进行动物致色素实验。取棕色豚鼠6只，均予背部 二侧剃毛成11个1．5×1．5cm大小的去毛区，将中药乙醇提取液依次涂抹，每日2次：第11处{：毛区 涂乙醇为阴性对照。28日后取皮肤活组织，进行下列三项观察：①【fE染色：光镜下观察每份标j：的组 织学政变；②含黑素颗粒细胞计数：用schmo，’1法染色，高倍镜下单盲计数每100个基底细胞台黑素 阳性细胞数。 (5)数据处理和统计方法：(2)、(3)实验采H{配对计量资料t检验，(4)实验采用配伍方差分析。 2．结果 21 中药对酪氮酸酶活性的影响：56砷中药中，有27种对酪氨酸酶有激活作用．按作用强j目依次 为鸡血藤、夏枯草、女贞广、薄荷、漳蒺藜、申姜、早莲草、黄芩、泽兰、甘草、毛茨菇、白藓皮、独活、 苦参、黑芝麻、苏叶、刺蒺藜、何首乌、紫荆皮、桃仁、自芨、北沙参、菟丝子、大艽、苏梗、补’寻脂、 茵陈。前11种中药乙醇提取物对酪氨酸酶