异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物的体外抗癌活性的研究.pdfVIP

参考文献 [1] 中国医学科学院. 学生工作手册. 北京：人民卫生出版社，1973 [2] 谢业琪. 一些人类遗传状与身体素质关系之研究. 沈阳体育学院学报，1992 [3] 赵桐编. 人类血型遗传学.北京：科学出版社，1987：226 －238 [4] 论血型与性格人生的关联.TOM 资料库. 2002－02 [5] 黄元维. 血型与个性. 汕头大学出版社.1999 [6] 方秋丽等. 体育系学生血型调查分析. 山东料城师范学院体育系学报, 1995－01 [7] 王广结，李文先等. 内蒙地区9 个民族的 ABO 血型分布. 人类学学报, 1994, 13 （2 ）：165－170 作者介绍 乔艳辉（1980），女，汉族，新疆，在读硕士研究生，研究方向：人类遗传学，电话：0991 －8589549，E －mail: qyh721@163.com 多力坤·买买提玉素甫（1960），副教授，研究方向：人类群体遗传学，E －mail: duolikunm@ 异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物的体外抗癌活性研究 阿不都热依木·玉苏甫 1，2 哈木拉提·吾甫尔 2 吐尔洪·卡迪尔 1 3 3 Isabelle BAUDRIMONT Nicholas MOORE 1.新疆维吾尔自治区维吾尔医研究所 乌鲁木齐 830001 2.新疆医科大学药学博士后科研流动站 乌鲁木齐 830054 3.法国波尔多第二大学 法国波尔多 33076 关键词：异常黑胆质成熟剂 黄酮类化合物 抗癌活性 在以往的研究工作中，我们发现异常黑胆质成熟剂乙酸乙酯萃取物对HepG2细胞体外生长、诱 导癌细胞DNA链断裂、阻滞细胞周期、上调抑癌基因p53 、p21 mRNA表达等方面具有较明显的作用， 并发现异常黑胆质成熟剂的乙酸乙酯萃取物富含黄酮类化合物。[1] 因此，本文中我们在提取异常黑 胆质成熟剂黄酮类化合物的基础上，采用分子生物学实验技术研究异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物 对HepG2细胞体外生长、凋亡及相关基因调控的影响，探讨其抗癌活性的作用机理。 1 材料与仪器 1.1 主要试剂 Dulbeccos modified Eagle medium (DMEM) 、胰蛋白酶－0.02%EDTA、青霉素－链霉素双抗、胎 牛血清、MTT 、琼脂糖、碘化丙啶、核糖核酸酶 A ，Sigma–Aldrich （Lyon, France ）公司产品；L– 谷氨酸盐（200mM ）、溴化乙啶、DNA Marker 、SV Total RNA Isolation System、Reverse Transcription System，Promega （France ）公司产品。 1.2 癌细胞株 人肝癌细胞株 (HepG2) ，American Type Culture Collection (ATCC)提供。 1.3 样品制备 异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物由新疆维吾尔医研究所植化实验室制备。实验前，精确称量黄 酮类化合物干粉一定量，置于 15mL 离心管内，加入一定量超纯水，用漩涡振荡器振摇，完全溶解 1361 使其成 100mg/mL 样品母液。然后用 0.45µm Millipore 膜过滤装置于无菌条件下过滤样品母液，使其 成 100mg/mL 无菌样品母液，于－20 ℃冰箱内保存，备用。实验前将无菌样品母液，以 DMEM 稀释 至所需浓度，用于细胞培养实验。 1.4 主要仪器 CO2 培养箱，法国 Jouan 公司产品；MR4000 酶标仪，法国 DYNATECH 产品；Power Pac BasicTM Electrophoresis 、GEL–DOC 2000 凝胶成像系统，美国 Bio －Rad 公司产品；PCR 扩增仪，美国 INC 产品；FACSCalibur 流式细胞仪，美国 Bec