武汉肉类食品中大肠杆菌O157∶H7分离株stx亚型和毒力特征分析.pdfVIP

942014,Vo1．35,No．08 食 品科 学 ※分析检测 武汉肉类食品中大肠杆菌O157：H7分离株 stx亚型和毒力特征分析 郑冬冬 ，毕旺来 ，王宏勋 ，刘志国 ，丁洪波 ，李 睿 术 (1．武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北 武汉 430023；2．武汉轻工大学食品科学与工程学院， 湖北 武汉 430023；3．农产品加工湖北省协同创新中心，湖北 武汉 430023) 摘 要：从22家市场销售的117份肉类食品中分离出4株大肠杆菌O157：H7菌株，经PCR检测这4株菌的stx、my、 eae毒力基因均为阳性。采用聚合酶链式反应 (polymerasechainreaction，PCR)法对这4株菌的stx亚型进行鉴定。 3株菌同时携带stxl、stx2基因，且均为stxla、stx2a亚型。菌株EC5．1l仅携带stx2基因，但在所有的stx2分型PCR反 应中都为阴性。用PCR扩增该菌株stx2基因全长并克隆测序，序列分析结果表明EC5．11志贺毒素基因为stx2c亚型。 采用Vero细胞毒性实验检测这4株菌产志贺毒素的状况，结果显示这些菌株都具有一定的Vero细胞毒性。 关键词：大肠杆菌O157：H7；志贺毒素；six亚型；Veto细胞毒性 stxGenotypesandVirulenceCharacteristicsofE．coliO157：H7StrainsIsolatedfrom MeatProductsCommercializedinW uhan ZHENGDong—dong ，BIW ang—lai，WANGHong—xunzLIU Zhi—guo，DINGHong—bo，LIRui，：l： ， (1．CollegeofBiologicalnadPharmaceuticalEngineering，WuhanPolytechnicUniversity，Wuhan 430023，China 2．CollegeofFoodScienceandEngineering，WuhanPolytechnicUniversity，Wuhan 430023，China； 3．HubeiCollaborativeInnovationCenterforProcessingofAgriculturalProducts，Wuhna 430023，China) Abstract：A totalof117raw meatsampleswerecollectedfrom 22marketsinW uhna ，ChinaandfourE．coli0157：H7 strainswereisolatedrfom thesemeatsma ples，whichwerepositiveofrstx，htyna deaegenes．Thestxvarinatgeneswere furthersubtypedbypolymerasechainreaction(PCR)usingsequence·specificprimerstargetingeachstxvariant．Three isolateswerefoundtocarrybothstxlandstx2genes，andtheprevalentstxgenotypeswerestxlaandstx2a．OneisolateEC 5．11wasfoundtoCalTyonlystx2genebutitcouldnotbesubtypedbyPCR assay．Theentirestx2genewashtenamplifiedfrom EC 5．11．clonedintoavectornadsequenced．Sqeuencingdatashowedhtathtestx2geneofEC5．11was100％ identicaltohte pubhshedsqe