人穿孔素真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达.pdfVIP

感染性疾病实验室诒嘈斤研讨会萱实验室雀I理论坛 论文汇蝙 在cE中，很多因素都会影响到分析的精密度，例如进样的重现性、电场在毛细管中分布的均匀性、 毛细管内壁的电荷分布情况以及毛细管的散热等问题，这些都会影响毛细管电泳的精密度。因此无论样 品前处理好坏，应尽量用内标法进行定量。卒实验选取人体不舍有的D-正自氨酸为内标，实验中p正 白氨酸出峰与标准品及脑脊液样品中氨基酸峰位上没有任何干扰。 结果表明，病毒性脑炎早期脑脊液中4种氨基酸含量与正常对照组比较含量变化小，PO．05，没有 和Asp)参与疾病的病理生理过程中，可能与一些临床损害性病理改变或疾病症状严重性密切相关。生 理情况F，E从s和I从s主要存在于神经末梢的囊泡内，末梢去极化时，释放到突触间隙，作用于突触后膜 N一甲基一D一门冬氨酸受体(NMDA)发挥其生理功能。近年来研究发现，在脑出血时细胞外液E从s和I从s 均会变化而干扰神经元的调节功能，导致神经元急性或迟发性损伤。本研究检测发病24～72小时脑脊液 其原因可能为：(1)疾病致脑组织发生病理生理改变导致一些神经元持续性去极化，释放G1u和G1y。继 而引起ca’的内流．反过来又加重G1u和6ly的释放．由此形成恶性循环：(2)血肿压迫造成局部组织血 通过不依赖cf‘的方式透过胞浆膜释放到缅胞外液中。Keith等研究认为，Gly虽为一种抑制性氨基酸， 细胞损害。因此，检测csF中E从s和I从s在脑病早期的含量，能够为早期诊断、早期治疗提供客观性 依据：同时有助于进一步研究EAAs和I从s在脑病中的病理生理学机制。 参考文献 [1]蒋滢，黄美英．脑疾病与游离氮基酸的研究．氨基酸和生物资源，2001．23(1)：42—44． [2]董为伟．神经保护的基础与临床．北京：科学出版社，2002：12卜129． [3]刘晓红。蔡宝珍，支町皖君．新生儿缺氧缺血性脑损伤脑脊液氨基酸含量的变化及临床意义，中 国儿科杂志，2000，3(1)：40一44． [4]卢红，张中兴。宋景贵，等．急性脑梗死患者血、脑脊液兴奋性氮基酸的变化和意义．中国急救 医学，2002，22(4)：193—195． [5]王锦，沈霖霖．曹银祥。等．高效液相色谱一荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸．检验医学 2005。20(5)：424q27． [6]黄晓，康学军，肖静，等．高效液相色谱法侠速测定氨基酸类神经递质．检验医学，2006， 21(3)：215—218． 39-43． [7]戴红，张宗才。张新申．氨基酸分析的检测方法评述．皮革工程。2004，14(3)： [8]曹君利，张亚海，顾钧，等．用毛细管电泳～激光诱发荧光技术检测清醒吗啡戒断大鼠导水管周 围灰质徽透析液中谷氮酸和精氨酸的含量。生理学报，2003，55(5)：612_616。 [9]沈佐君，孙自敏，吴琳．上样前样品萃取与浓缩技术在毛细管电泳法测定微量氨基酸中的应用． 上海医学检验杂志。2002。17(4)：216—218． V． Recentadvancesin锄inoacid electrophoresis． [10]Poinsot analysisbycapillary Electrophoresis，2003，24(22—23)：4047—4062． 人穿孑L素真核表达载体的构建及其在C0s一7细胞中的表达 张春华，李芳秋‘．缪家文 南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所，江苏南京210002 基金项目：南京市科技发展计划自然科学基金(批准号：200401070-5) 张春华： (1980一)，女，湖北洪湖人，理学硕士，从事医学遗传学专业。李芳秋，女。安徽淮北市 人，教授。理学博士，从事分子免疫学专业，本文通讯作者． D．i!i￡gg．i!业!iB!：￡鲤。 感染性疾病实验室访-断-研讨套置实验室管理论坛 论文汇编 摘要 目的：观察克隆的人穿孔素基因(pfn)在cos一7细胞中的表达情况。方法：用PCR方法获 基冈在COS一7