外伤后细菌性致死性肉芽肿致病菌的分型鉴定.pdfVIP

析了20周龄以上小鼠的表型改变，为揭示天然自身抗体与疾病的关系进行积极的探索。 方法：实验动物分为转基因阳性和阴性两组；全自动血球分析仪和生化分析仪检查血常规和血 结果与转基因阴性小鼠相比，阳性小鼠明显消瘦，弓背畸形，摄食减少，体毛皱褶，活动能力差： 雌性鼠的患病率大约是雄性鼠患病率的两倍；与雌性阴性小鼠相比，阳性小鼠体重减轻明显 高(以上PO．001)：此外，阳性小鼠红细胞计数，红细胞压积，血红蛋白值偏低，但是在统计学上 性蛋白尿为主；HE染色显示肾小球系膜细胞和基质增生，基底膜增厚(得到PAS、Masson染色支持)； 免疫荧光显示肾小球系膜区可见明显的IgM类物质颗呈粒状沉积，荧光强度为(++～++++)，阴性小 鼠只能见到微弱的荧光(—一+)，整个肾小球内未见IgG类物质沉积；电镜以系膜增殖性肾小球肾炎 为主、足突细胞广泛融合、变性，基底膜有不规则增厚，可见分离和双轨征，毛细血管内皮细胞大 致正常，肾小球囊外基膜增厚，球囊腔可见缩小，类似新月体形成。肾小管上皮细胞绒毛结构正常， auto 间质未见明显的炎细胞浸润以及淀粉样物质沉积。结论天然AK Ab的过度表达对小鼠的生理 机能产生重要的影响，转基因小鼠有发生自身免疫性疾病的倾向，这对全面研究天然自身抗体(N从) 的功能具有重要的意义。 外伤后细菌性致死性肉芽肿致病菌的分型鉴定 第四军医大学西京医院皮肤科齐显龙孙东杰徐修礼高刽 林琨李春英 高天文 bacteriaGranulomaafter 外伤后细菌性致死性肉芽肿是(Fatal Trauma；FBGT)一种近来才 被认识的致死性疾病，虽然在前期研究中初步构建成功本病动物模型，但本病发病机理仍不清楚。 acnes；P．acnes)。近 前期分离培养到致病菌，并明确鉴定为痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium 年来，有学者根据P．acnes的生化反应特征，将其分为IA、IB、II三个亚型，并且各亚型所导致 致病有所不同。为了明确本病致病菌的亚型，从而为深入研究本病发病机制打下一定基础，我们将 本病致病菌进行分型研究。 1材料和方法 1．1材料 737)。 分别指同一患者两次复发之后分离培养出的致病菌)，P．acnes标准株(NcTc PrimeSTAR住HSDNA Polymerase(高保真DNA聚合酶，购于Takara公司)，． ·24l· 1．2方法 1．2．1细菌生化鉴定分型 在含有40mg／L的溴甲酚紫的厌氧脑心浸液琼脂平板上，分别含有l％的甘露醇、山梨糖、 赤藻糖，接种菌落，在厌氧环境中培养，37C厌氧培养，指示剂颜色从紫色变成黄绿色判定为阳性， 以NCTC737同时行发酵试验作为对照。 1．2．2recA基因扩增及测序 DNA提取： 育96小时。无菌去离子水洗涤刮除平板上菌落，收集细菌悬液，离心收集细菌，加入无菌去离子水 酚氯仿法抽提细菌DNA，--20℃保存备用。 设计合成引物如下，为了保证测序结果。引物设计向目的基因能两侧适当顺延： recA正向引 物：正向：5’GGGGCGGGAGAcCGCCl’，r(一33一一15) 反向5’GTCAATTCTGGCTGCAGA(+18一一-}-34)产物1114BP。 min。 延伸1．5min。30个循环。72℃延伸5 物(按照试剂盒操作规定进行)，产物送北京奥科公司测序。 1．2．4发育树构建 测序结果行BLAST分析。按照DNAMAN软件要求构建发育树。 2结果 2．1发酵试验结果 根据发酵试验结果，可以认为患者李超的致病菌为II型，其余致病菌和NCTC737均属于I型。 表1分型发酵试验结果 2．2 recA基因扩增及测序 2．3发育树构建：