西农萨能羊Ets-1基因cDNA的克隆和序列分析.pdfVIP

·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·137· 西农萨能羊麟。基因cDNA的克隆与序列分析 石恒波，罗军。，李君，许会芬，胡仕良 (西北农林科技大学动物科技学院， 陕西省农业分子生物学重点实验室，陕西杨凌712100) 引言 E26 赖的信号通路、TGF-13和JAK／STAT信号通路等。研究发现，众多参与细胞外基质降解的蛋白酶类、细胞因子的启动 子序列中含有Ets一1的结合位点。山羊泌乳过程中脂肪酸代谢受到众多基因的调节，这些基因表达调控常常受到多 种信号通路以及多种细胞因子的调控，研究表明，眈一J基因能通过调控一些细胞因子影响细胞脂肪酸的代谢。本研 究旨在克隆西农萨能羊Eu—J基因的cDNA，为进一步研究该基因在山羊泌乳过程中的功能奠定基础。 材料与方法 Premier 采集泌乳盛期的西农萨能羊乳腺组织，Trizol法提取总KNA，反转录成cDNA；利用Primer5．0和 Oligo 5’RACE for ofcDNA SystemRapidAmplificadon RACECore 性分析；通过BioXM ORF翻译后的氨基酸序列作疏水性分析。 结果 rI．R 克隆得到西农萨能奶山羊风一J基因的cDNA序列，其全长2263bp，包括5’I331bp。CDS1326bp。和 他物种相似性较高，其OR．F与牛、人、小鼠和猪的眈一J基因相比较，核苷酸相似性分别为98％、92％、90％和94％，氨 基酸的相似性分别为98％、98％、96％和98％。其非翻译区核苷酸与牛、人和猪的相应序列相比较，5’UTR相似性为 98％、82％和85％，3’I 水性预测分析表明。Ets-I存在较强的疏水性。 讨论与结论 本研究首次克隆了山羊踟一J基因的cDNA序列，该基因在各物种间非翻译区(5’UTR和3’IrrR)的相似性不 高，并存在较大差异。目前的研究表明，大多数基因非翻译区对基因转录和翻译水平的调控起到非常重要的作用，大 多数调控序列也都集中于非翻译区，故本实验对山羊基因的非翻译区进行了克隆，为该基因的调控机制研究莫定基 础。同时也为本实验室对参与山羊脂肪酸代谢的microRNA的研究提供了奠定基础。目前关于胁一J在肿瘤方面的 研究广泛，但在其他方面研究较少，尤其是该基因在泌乳过程中对脂肪酸代谢的调控的研究更是欠缺。因此，本实验 对奶山羊乳腺胁一，基因进行克隆与分析，为转录因子Ets一1在山羊泌乳过程中的脂肪酸代谢的调控机理研究莫定 基础。 关键词：西农萨能羊；Ets一，基因；克隆 致谢：本研究受转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08009—162B)资助完成。 ·通讯作者。