三步法分离纯化副干酪乳杆菌细菌素的初步研究.pdfVIP

巾回虐学c亟报 2014，30(24)：316·320 ChineseAgriculturalScienceBulletin 三步法分离纯化副干酪乳杆菌细菌素的初步研究 葛菁萍 ，辛 星 ，王瑶 ，宋 刚 ，平文祥 (黑龙江大学生命科学学院／微生物省高校重点实验室，哈尔滨 150080； 农业微生物技术教育部工程研究中心，哈尔滨 1505OO) 摘 要：为了提高副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)HDwy．1细菌素的分离纯化得率和活性。本研究 主要利用三步法从副干酪乳杆菌HDwy一1发酵液中分离纯化得到抑茵物质副干酪乳杆菌细菌素，分别 采用硫酸铵沉淀、CM SepharoseFastFlow阳离子交换柱层析和 SephadexG．75凝胶层析分离技术对副 干酪乳杆菌HDwy．1产生的细菌素进行纯化。结果表明：细茵素得率为39．93％，比活为1．56x10AU／mg， 是纯化前的2．87倍，得到的细菌素样品经Tricine．SDS．PAGE电泳出现清晰条带，大小约为72KDa。通 过该方法可以较好的对副干酪乳杆菌的细菌素进行回收。该工作为研究茵体 内细茵素的理化性质及其 开发应用提供 了理论基础。 关键词：副干酪乳杆茵；细菌素；分离；纯化；Tricine．SDS．PAGE 中图分类号：Q93 文献标志码：A 论文编号：2014．0057 APreliminaryStudyof“TheThree—stepM ethod’’inPurificationof aBacteriocinfrom LactobaciUusparacasei GeJingping。，XinXing，WangYing，SongGang，PingWenxiang~ (KeyLaboratoryofMicrobiology~CollegeofLfieScience，Heilon~iangUniversity，Harbin150080； 2EngineeringResearchCenterofAgricuhuralMicrobiologyTechnoolgy,MinbtryofEducationHeilon~iang，Hrabin150500) Abstract：InordertoimprovetheyieldandactivityofbacteriocinproducedbyLactobacillusparacaseiHDwy一 1．thepurificationofantibacterialsubstanceswasstudiedwiththethree—stepmethod．Theantibacterial substanceswereextractedandpurifiedbytheAmmonium sulfateprecipitation．CM SepharoseFastFlow ion— exchangechromatographyandSephadexG一75gelfiltration．Itisshownthatthefinalyieldofbacteriocinwas 39．93％ andhtespecificactivitywas1．56x103AU／mg．Thespecificactivitywasincreased2．87fold．Tricine- SDSshowedthatitsmolecularweightwasabout72KDa．Themethodhadshowngoodresults，which providedhteoreticalfoundationforphysicochemiealpropertyanddevelopmentofbacteriocin． Keywords：Lactobacillusparacasei；bacteriocin；extraction；purification；Trieine—·SDS— 0引言