卵黄抗体的制备技术及应用的研究进展.pdfVIP

(第八届全国饲料添加剂学术暨新技术，新产乩交流会论文集 卵黄抗体的制备技术及其应用研究进展 李建涛蔡辉益刘国华常文环 (中国农业科学院饲料研究所，北京100081) l引言 免疫力低是新生和幼龄动物死亡率高的一个重要原因。例如仔猪。由初乳获得的被动免疫保护，3 周龄时所省无几，此时自身尚无有效的主动免疫功能，4—5周龄时产生的抗体仍很少，7周龄时肠道免 疫才基本成熟(张宏福等，2000)，结果造成早期断奶仔猪腹泻甚至死亡。有两种途径可以提高新生 和幼龄动物免疫力：①通过营养或免疫调控技术促进免疫系统组织和功能的成熟以增加主动免疫力； ②增加母源抗体或使用外源抗体以提升被动免疫力。卵黄抗体能为动物提供迅速的被动免疫保护，作 为一种新型的抗生素替代品，近年来受到大家关注。 2 IgY生产 2．1产量云‘j响因素 与哺乳动物通过初乳转移免疫球蛋白相似，产蛋鸡能将血液中大多数免疫球蛋白通过皿液循环和 抗原特异性抗体占鸡蛋整个抗体数量达到lO％，范围是5％(抗胰岛素抗体)至tJ28％(抗鼠IgG抗体)， 这个比例取决于免疫个体、免疫程序及抗原本身的免疫原性等。 影响JgY产量的因素包括：①抗原的质与量；②免疫次数、间隔；③产蛋鸡品种、产蛋率、蛋重或 卵黄重；④产蛋鸡营养及健康状况，等。 2．2免疫程序 体积乳化的抗原；首免后第3、5、7雨]25周用弗氏不完全佐剂乳化抗原进行2—4次加强免疫，剂量逐步 放大1．2倍。这种多次注射加强剂量的抗原使之产生较高自动获得性免疫的过程，称之为”超免疫作用 ”。通过超免疫作用，产蛋鸡的免疫系统不断被刺激，发生免疫应答，并在数月内维持高的血液特异性 抗体滴度并持续不断向卵黄中分泌高浓度抗体。 2．3IgY的优点 2．3．1相对稳定 在结构上，lgY与IgG稍有差异，多1个稳定区但没有绞链区(见下图)。这种差异没有影响lgY的 抗原．抗体结合特性及结合能力，但缺少韧性及功能种类，在确定条件下沉淀及聚合反应能力降低 月IgY活性损失很小。与lgG相比，lgY具有较强的抗热、抗酸、抗离子强度和一定的抗酶分解能力。60 ℃、3．5分钟条件下巴氏消毒不影nl匈IgY免疫活性(Hatta 胃蛋白酶存在条件下，pH2．0以下才完全失活，在胰蛋白酶和胰凝乳酶存在的条件下比较稳定，这使其 没有损失(OlovssonM等，1993)。用做饲料添加剂或兽医临床上，lgY多以全卵黄或其水溶液的形式 130 《第八届全圜饲料添加剂学术烃新技术、新产牖交流会》论文集 直接利用，或制成干粉利用。幼畜可以U服，提纯后可以肌注(孙希琪，1995)。 IgY IgG 2．3-2安全 USDA和FDA认为IgY安全且已允许商业生产用于人，毕竟人类每天都消耗大量鸡蛋，且许多鸡蛋 都有岛的免疫抗体水平。长期使用抗生素产生抗药性，使抗生素用量增加或治疗效果下降。IgY作用方 式与抗生素不同，不会产生抗生素，无疑是很有前途抗生素替代品之一。 2．3．3易于生产 与兔血清抗体相比，生产lgY方法简单、温和，对动物不具有大的侵害性，符合动物福利；母鸡易 于饲养，费用低；免疫反应时间怏，需要抗原量较少(200—300ug)；易于纯化，比实验室条件下通过 实验动物制备有限的高免皿清更有实用性。 目前我国鸡蛋生产供过于求，另一方面我国养殖生产中疾病造成很大损失。将产蛋鸡作为”生物反 应器”生产IgY是增』J口蛋鸡生产效益和符合环保要求控制动物疫病的有效措施。 3 IgY防治仔猪腹泻的效果 lgY不与哺乳动物IgG互补，也不与其它球蛋白有交叉反应，对病原菌感染的防御无动物的种属差 异。这些特性使IgY在家禽、水产、奶牛等疾病的防治方面都很有用，用于防治仔猪腹泻效果明显。 细菌是导致仔猪腹泻的直接原因，其过程为：仔猪消化功能不完善、饲粮消化率低一大肠杆菌等 有害菌增殖并产生毒素一毒素与肠黏膜细胞上相应受体结合一+黏膜损伤一肠道吸收能力降低、分泌能 力增加一腹泻。大肠杆菌是主要的致病菌，由于血清型复杂，免疫缺乏针对性，长期使用抗生素导致 抗药菌株不断增多，药效下降。IgY的作用方式是：通过附着在细菌的细胞膜上，改变细胞膜完整性； 或附着在细菌的菌毛上，使细菌无法附着