枯草芽孢杆菌A-12的发酵条件以和抗菌物质的研究.pdfVIP

旱、半干旱地区生态条件的显著特征，是严重制约根瘤菌共生固氮作用的重要限制因 子。如何筛选到适应当地土壤环境、具有较强竞争结瘤能力和高效固氮能力的根瘤菌 株系，构建高效、 抗逆性和适应性强苜蓿一根瘤菌共生体系，充分发挥根瘤菌的固 氮效能，是一个尚待解决的科学问题。 本研究从新疆北疆呼图壁、昌吉、石河子等地栽培及野生的苜蓿根瘤中分离根瘤 菌株，对其进行耐盐、耐酸碱、耐氨离子、耐干旱、耐高低温等抗逆性能的测定，以 期筛选出固氮效率高、抗逆性强的菌株，为优质高效根瘤菌剂的研制提供种质资源。 研究结果表明，供试的30个分离根瘤菌株具有较强的耐盐性，均能在含Nacl：Na2s04 (2：1)1％．12％盐浓度的Ⅶ压A培养基上生长，有53％的菌株在12％的盐浓度下生 5—11之间能生长，80％的菌株表现出 长良好。大多数菌株耐pH值范围较广，在pH 12仍能保持生长。菌株对NH4+的适应范围较宽，在NH4+浓度 较强的耐碱性，在pH O．10 mmol／l mmol／l均能生长，1—2NH4+下生长量最高。对高氨浓度(10mmol／lN山+) 耐受力较强的菌株占供试均的26．7％。以PEG6000人工模拟干旱条件测定菌株的耐 旱性能表现出多样化的特点，大多菌株能耐受．1．2 mPa的渗透势，26．7％的菌株对．1．5 mPa表现出一定的性耐受。菌株对温度适应范围较宽，在15．35℃范围内均可生长； 70％的菌株在10℃下仍能生长，60％的菌株在4％低温下仍有活力；40℃或60℃热 激处理lomin，80％和70％的菌株仍能保持活力。研究结果显示，新疆北疆根瘤菌普 遍表现出较强的抗盐、耐碱、抗高温的能力，但不同菌株间存在较大差异。 枯草芽孢杆菌A．12的发酵条件以及抗菌物质的研究 胡小加余常兵谢立华李银水廖星+ (中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料作物生物学重点开放实验室，武汉430062) 枯草芽孢杆菌(B口cf，，“ss柏，f凰)A．12分离自油菜根部，在油菜根圈能够有效定 殖、促进油菜生长和防治油菜菌核病。本文以A．12为材料，对其进行了产抗茵物质 的发酵条件研究，并从其发酵液中分离纯化出能抑制多种植物病原真菌的小分子类似 抗菌肽物质。 采用不同的培养温度、不同的培养时间、不同的培养基pH值以及不同的通气量、 培养基c／N比对枯草芽孢杆菌A．12进行发酵培养，对其发酵液的抗茵物质产量和抗 菌活性进行了检测；得到了A．12生长繁殖和产生抗菌物质的优化条件为：pH值为 培养条件；在这个条件下培养48h，细菌菌数达到最大值，培养72h，抗菌物质产量 达到最大值。 枯草芽孢杆菌A．12所产生的主要拮抗物质属胞外分泌型，释放到培养液中，具 5．9的环境作用等特性；具有多种抗逆作用性质。 有耐12l℃高温、耐pH 抗菌物质可以溶解于甲醇、乙醇等有机溶剂中，通过调节pH值沉淀、有机溶剂 抽提、分离纯化抗菌物质，最后通过葡聚糖凝胶层析可以得到较纯的抗菌肽。 A．12菌体以及抗菌物质可使油菜菌核病原菌等lo多种病原真菌的菌丝生长畸形， 菌丝膨大、断裂，最后崩解。在油菜、大豆和玉米离体叶片防治试验中，表现出具有 较高的抑制活性。枯草芽孢杆菌A．12所产生的抗菌物质具有很强的抗菌活性，将抗 菌物质的提取液稀释1000倍后仍然能保持显著的拮抗效果。 法接种到油菜植株上，都能诱导油菜体内相应防御酶活性的升高，从而产生植株抗性。 关键词： 枯草芽孢杆菌，抗菌物质，培养条件，生物防治 课题(201007)；中国农业科学院科技项目(201012资助 作者简介：胡小加(1960．)，男，副研究员，从事油菜根际微生物和生物肥料研究 +通讯作者：廖星，研究员，E—mail：Li垒Q丕@Qi!￡煦盥：鲤 内生解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌物质研究 张淑梅1，一，王玉霞2，孟利强2，李晶2，赵晓宇2，王傲雪P，李景富1+ (1东北农业大学园艺学院，哈尔滨，150030) 2黑龙江省科学院微生物研究所，哈尔滨，150010 第一作者：张淑梅研究员 e-mail：zsmhlj@