人血清蛋白的毛细管等速电泳分析.pdfVIP

参 考 文 献 [1]姚乾元，吉德珍，中草药，13,233(1982). [2]洪筱坤等译，《层析理论与应用》，上海科技出版社，上海，P.36，1981. [3]吴凤锷，有机化学，(),01984)..0 [4]吴凤锷，朱子清，化学学报，42，253(1984). 收（稿 日期：1985年4月15日） 人血清蛋白的毛细管等速电泳分析 朱冠梅 马孔阜 浙（江省中医院肺功能研究室，杭州） 毛细管等速电泳 C（apillaryIsotachophoresis）是近年来提出的既能分析又能制 备的一种电泳分离技术。在有适当的前导 L（eading）和终末 T（erminal）电解液存 在下，使电泳在一定长度毛细管内的高压梯度电场中进行。由于使用传递体：“Ampho- line”，电泳过程中使各组成成分，逐渐分为各自的单独区带，直到完全分离后，进入等 速状态，再经由检测器在记录仪上绘出各组分的峰谱，可在短时间内，有效的分离出多 种具有微小迁移率差别的离子混合物。 目前本法已用于生物学、生化学、药物学、化工及环境保护等领域，但用于临床医 学方面，国内尚少报道。现将我们对32例健康者和一些病理情况下，以本法对血清蛋白 分析的结果，介绍如下。 材 料 与 方 法 一（）测定对象：选确无系统疾患之健康男性及女性各16名，共32例，观察正常情 况下血清蛋白毛细管等速电泳变化。同时介绍5例有异常蛋白血症患者的测定结果，以 资比较。 二（）使用仪器：为瑞典LKB公司2127型等速电泳仪 “Tachophor”。测定用毛细 管长430毫米，紫外检测仪波长280毫微米，温度20℃妫，电压5.5～21千伏，电流50微 安。各组分分离后，依次在2210型记录仪上绘出，满格为20毫伏，记录纸速0.2毫米／秒， 分析时间在40分钟以内。 三（）试剂配制：前导、终末电解液及梯度分隔液的配制，均按Delmotte法[] （四）血清标本的制备：空腹抽静脉血 1毫升，凝固后分离血清，然后将血清与 梯度分隔液按 l:3容积比混匀备用。 五（）测定步骤：用两个20毫升注射器，分别吸满前导液及终末液，再插入各自的 电解槽内。先推注前导液充满液槽及毛细管，再以终末液注满其液槽及标本注入口处管 道，彻底排除槽中和管道内的微小气泡后，由标本入口处注入标本2.6微升，随即开启高 压电扭，当电压升达15千伏时，开动记录仪，连续记录出各组分峰。测定完成后，以求积 仪逐次计出各组分之峰带值，然后由总值求出各组分之相对值 （％），再按总蛋白测值 算出各组分之绝对值 (g/dL)。 测 定 结 果 一（）健康者32例血清蛋白分析结果：参照Delmotte[1]，Bours[2]及Hjalmer- sson[3等报告，我们将其划分为8个组分，它们分别为1．前蛋白 P（A），2．白蛋白A（）， 3蛋白.(P ).4．转铁蛋白 F（r），5．蛋白Ⅱ颍P），6．免疫球蛋白A及G(IgA+IgG)， 7免疫球蛋白G瘢gG ）及8．免疫球蛋白GⅡ?(IgG)。各组分的绝对值与相对值如表 1，典型一例组分图如图1。 健康男、女32例血清蛋白组分测定结果 表 1 组份 1、2、3的性质比较明确。组分3除α1抗胰蛋白酶 （1-AT）外，还有珠蛋白 (Haptogzlolin)。组分5则以 1酸性醣蛋白 （1-AcidGlycoprotein）为主。组分8 除IgG还含有IgM成分。 二（）异常蛋白血症时组分图与测值的变化 1.全身性红斑狼疮一例的改变如图2。TP明显增加，而以PA，PⅠ及IgGⅡ蛉三 者增高为主，PA尤为显著，值得注意。但A却显著减低。符合慢性反应型的改变。 2．肾病型肾炎一例变化如图3。特点为TP明显减低，而以A及Fr减少为主。 PA、P 及P 相反升高，符合分子筛选择性失蛋白的改变。 3．黄胆型肝炎急性期一例改变如