从猕猴肝脏组织扩增黄嘌呤脱氢酶%2f氧化酶(XDH%2fXO)基因片段.pdfVIP

从猕猴肝脏组织扩增黄嘌呤脱氢酶／氧化酶(XDH／Xo)基因片段 店东红‘，罗云2， I：城款2。黄英‘1，毕币生‘，叶尤松“ (1． 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所，昆l刃650118：2．云南省中医学院．昆I刿 650200) 【摘要1 口的RT-PCR扩增猕猴黄嘌呤脱氯酶／氧化酶(xDH／Xo)皋闪片段，为迸一步开展相关研 究提供实验资料。方法提取健康猕猴新鲜脏组织总RNA，用RT-PCR二步法进行XDH／XO綦因片段扩 增，对获得的目的片段核苷酸序列进行序列测定，测序结果经DNAMAN软件预测该段核苷酸的氨基酸序 列，与genbank，卜发表的人类(Homosapiens)、小鼠(Musmuseuhm)、家鼠(Rattusnorvegicus)、野猪(Susscrofa) 等物种XDH／XO皋岗进行该序列同源性比对分析。结果：RT-PCR产物lU泳检测得到r，’j设计人小相 一致的日的条带，序列测定共测到683个核苷陵，DNAMAN软件预测该段核苷酸的氨幕酸序列包括了1 个编码158个氨皋酸的开放阅读框(ORF)，通过该软件包中Multiplealignment对日的基|j=：|J；‘段的核昔酸 序列与NCBI报道的人类(U39487．1)、小鼠(NM0l11723．2)、家鼠(NM017154．4)、野猪(JN896312．1) XDH／XO綦I捌mRNA互补的eDNA核苷酸序列同源性进行同源性比较分析，结果显IJ÷所扩增得到的日的 片段’i人类同源性最高，为95．6％，与小鼠、家鼠、野猪的同源性分别为85．2％、84．3％、86．1％，说明获 得的基吲段足猕猴的XDII／XO瓞斟”段，tq．该綦l走lTli物种问具有较i岛的相似性。结论在体外成功扩增 }lj猕猴XDtI／XO皋闪”段，为进一步开展高尿酸m症致病机理研究，抗高尿酸JflL症新药研发奠定T作暴 础。 alivertissueofrhesus PCR ofthexanthine from genefragment monkey amplification dehydrogenase／oxidase 2 TANG 1，Luo Chert。kuan Yin91，Bizheng—shen91，YeYou—song’。 Dong．hongyun2,Wang Huang UnionMedical (1．Institute Biology?ChineseAcademyofMedicalScience／Pelting College．Kunming ofMedical 65011China 2．Yunnan Chinese 650118,China．) UniversityofTraditionalMedicine。Kunraing thexanthine from fragment Abstract：objective‘Foamplify dehydrogenase／oxidase(XDIUXO)gene was thelivertissuefor livertissueofrhCSUSforfurtherresearch．MethedsTotalRNAextracted厅om monkey