与合疏养方治疗实验性大鼠肝纤维化的量效关系研究.pdfVIP

和合疏养方治疗实验性大鼠肝纤维化的量效关系研究 池晓玲，萧焕明，吴惠君 广东省中医院肝病科，510120 通讯作者：池晓玲，!bi!i垫!i监g缝!§i：!!翌，电话020 和合疏养方是广东省中医院临床应用治疗慢性乙型肝炎的经验方，临床应用表明本方具有 较好的改善慢性乙型肝炎患者乏力、腹胀、纳差、失眠等临床症状，能够促进肝功能恢复，联 合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎，能够有效降低拉米夫定的YMDD变异率。本实验通过和合疏养方 治疗实验性大鼠肝纤维化的量效关系，进一步验证其临床疗效。 1．材料与方法 1．1动物 中心提供。按照正交设计的方法，将60只大鼠随机分成4组：空白对照组、模型组、阳性药对 照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组，每组10只，雌雄各半。 1．2药物 和合疏养方主要由柴胡、白芍、党参、茯苓等组成，饮片由广东康美药业有限公司提供， 以上药材按“饮片标准汤剂”的制备方法煎煮提取2次，第一次加6倍量水，浸泡20分钟，煎沸 后改用文火慢煎，煎煮30分钟，第二次加4倍量水，煎法同上，滤过。滤液合并浓缩，冰箱保存 备用，用时以蒸馏水配成所需浓度；联苯双酯滴丸(北京协和药厂生产，批号，每 丸含联苯双酯1．5mg，试验时以309／L的二甲基亚矾1～2ml溶解，再用蒸馏水稀释至所需浓度。 1．3造模： 1．3．1肝郁脾虚模型造模 综合运用慢性束缚应激、过度运动和饮食失节三种方法。分组前一天，所有大鼠进行游泳， 排除游泳时间超过20rain，或短于】Omin的大鼠。将符合条件的大鼠分组编号后于每天上午8 点放入束缚筒中限制3h，下午2点再将大鼠从束缚筒中放出，放入盛有温水(22±1)℃的大塑 料桶中游泳10min。隔日禁食，隔日足量给食，不固定给食，连续4周““。 1．3．2慢性肝损伤造模 模型组、联苯双酯阳性药对照组和和和合疏养方治疗组予30％CCl4花生油腹腔注射，每次 为0．2ml／kg，正常对照组给予腹腔注射同等体积的生理盐水，均每隔3d注射1次，连续4周”“。 第4周取2只模型鼠确定是否造膜成功，余大鼠眼球采血，检测肝功能等指标。 1．4干预措施 造模成功后，肝郁脾虚肝损伤模型组予等量蒸馏水灌胃至8周。阳性药物对照组予联苯双 治疗至8周。正常对照组不加任何刺激，自然饲养，在第4周至8周予等量蒸馏水灌胃。 1．5观察指标 每周末观察并记录各组大鼠的行为状态、活跃程度、情绪反应、皮肤毛发、饮食状态、睡 眠状态、大便状态等方面的变化。每隔3-4天称重1次，观察大鼠体重的动态变化。同时，完 理组织学观察 病理组织学观察：根据肝组织和肝细胞等病变轻重程度不同，依次标记为“一、+、++、+++”， 表示，无明显改变、轻度的病理改变、中度的病理改变、重度的病理改变。 2．统计方法 进行统计处理，组间两两比较采用LSD法。方差不齐者，采用多个独立样本秩和检验和非参多 重比较法检验。P=O．05。 3．结果 3．1和合疏养方改善肝功能的疗效评价 模型组大鼠的ALT、AST、GGT活性较正常组明显升高。经过药物干预，阳性药对照组和中 养方高剂量组与阳性药对照组相比，在改善ALT、AST活性方面更具有优势，两组比较，差异有 统计学意义(PO．01)。 在和合疏养方不同剂量改善肝功能的疗效方面，从表1可以看出，随着用药浓度的增加， 对肝功能的改善更佳，通过4周干预，使肝损伤大鼠肝功能接近正常。 表l和合疏养方对肝功能ALT、AST、GGT的保护作用 组别 例数 ALT(U／L) AST(U／L) GGT(U／L) 正常组 7 5l_6±4．47 150．9±5．15 10．8±1．09 模型组 9 166．9±8．66* 356．2±29．09* 20．5±1．30* 210 阳性药对照组 10 71．7±3．166 173．8±11．126 11．7±1．476 中药低剂量组 9 85．8±5．216 226．7±86．15△ 15．9±1．086 中药中剂量组