硫代磷酸化修饰的反义 TGF-β1寡核苷酸抑制血管损伤后内膜增殖.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(8)：1433．1438 · 1433 · [文章编号】 1000-4718(2014)08—1433-06 硫代磷酸化修饰的反义TGF一 寡核苷酸抑制 血管损伤后 内膜增殖 林志鸿 ， 谢 良地 ， 吴可贵 ， 李庚山 ， 蔺佩鸿 (福建医科大学 。附属第一医院急诊科 ，附属第一医院干部病房，福建省高血压研究所 ，福建 福州350005； 武汉大学人民医院心内科，湖北 武汉 430000) [摘 要] 目的：探讨反义转化生长因子31(TGF-B。)寡核苷酸对血管损伤后血管平滑肌细胞 (VSMCs)表型 转变的影响及对内膜增殖的作用。方法：在跨过TGF—B。cDNA序列的起始密码区ATG范围内，设计含 15个碱基、 无修饰或硫代磷酸化修饰的反义TGF-p。寡核苷酸(ASTGF．B。)及对照的正义 (与反义寡核苷酸互补)寡核苷酸 (STGF-B。)。球囊导管损伤SD大鼠颈总动脉，术后7d取出正常或损伤的血管进行VSMCs的培养 ，RT-PCR及蛋 白印迹分别检测VSMCs生物学标志平滑肌220t蛋白(SM22ct)、基质Gla蛋白和骨桥蛋白，以及TGF．B。和纤维连结 蛋白(fibronectin，FN)mRNA和蛋 白质的表达。采用 ALZET泵皮下注射硫代磷酸化修饰 ASTGF一13l及 STGF-31l (90 g·kg～ ·d )，连续给药28d后测定血管内膜与中膜的面积比(I／M)。结果：(1)ASTGF—B。对血管损伤后 VSMCsTGF-BmRNA表达并无明显作用，但呈浓度依赖性抑制TGF．B，蛋 白质的表达 ，而 STGF-p 不影响TGF- 8mRNA和蛋白质的表达。(2)ASTGFB·，呈浓度依赖性抑制血管损伤后 VSMCsDNA的合成，而不管是ASTGF- pl还是STGF．B1对正常VSMCsDNA的合成均无明显的量效作用；同时ASTGF．B1显著抑制了血管损伤后VSMCs FN的合成。(3)ASTGF-p，显著促进了VSMCsSM22otmRNA的表达，但抑制了基质Gla蛋白和骨桥蛋白mRNA的 表达，这种相反的作用在0．O1及0．1I~mol／L的水平最为明显。(4)硫代磷酸化修饰的ASTGF．B。治疗28d后 ，显 著抑制了颈动脉损伤后新生内膜的增殖，I／M比对照组下降了68％。结论：ASTGF-B。特异性抑制了VSMCsTGF- B。蛋白的表达 ，抑制血管损伤后 VSMCs增殖及合成、分泌FN，减轻血管损伤后新生内膜的增殖。上述作用可能与 逆转血管损伤后VSMCs的表型转变有关。 [关键词] 转化生长因子 B；反义寡核苷酸；血管损伤；平滑肌细胞 [中图分类号] R543．5 [文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．08．017 Ph0sph0r0thi0ate—modifiedantisenseTGF- 0ligode0xynucle0tideinhibits neointimalhyperplasiaaftervascularballooninjuryinrats LIN Zhi．hong ，XIE Liang．di ，WU Ke—gui ，LIGeng．shan ，LIN Pei．hong (EmergencyDepartmentofFirstAffiliatedHospital，Cadres耽 ofFirstAffiliatedHospital，FufianHypertensionRe— searchInstitute，FujianMedicalUniversity，Fuzhou350005，China；DepartmentofCardoilogy，RenminHospital，Medcial CollegeofWuhanUniversity，Wuhan430000，China．E—mail：fzlinzh@163．com) [ABSTRACT] AIM ：Toevaluatethe