microRNA-let-7家族在约克夏猪甲状腺生长发育过程中的表达分析.pdfVIP

一 量鲐_u穗 Onlines 嘞 装ystem： r。g．。gy 囊昂■嫩疆■穗棚■■ 盥 篱 microRNA—let．7家族在约克夏猪 甲状腺生长发育过程中的表达分析 王琪 王云霞 王颖 徐宁迎 1浙江大学动物科学学院，杭州310058；2太原理工大学 力学学院，太原030024 通讯作者，wangying03@tyut．edu．cn；nyxu@zju．edu．cn 摘 要 miR—let一7广泛参与动物组织器官发育调控，是研究猪 甲状腺发育的重要候选miRNAs。为了研 究miR．1et一7家族在约克夏猪(Susscrofa)甲状腺生长发育过程 中的作用，本实验一方面通过对不同发育阶 段(胚龄 105，出生后60、90、150日龄)的猪 甲状腺组织切片进行苏木精一伊红染色 (hematoxylin．eosin staining，HE)，研究甲状腺发育形态学的变化；另一方面，采用原位杂交(insituhybridization，ISH)和荧光 定量PCR技术鉴定miR-let一7家族在不同生长阶段(胚龄 105，出生后60、90、150日龄)约克夏猪 甲状腺中 的表达。HE染色结果发现，甲状腺滤泡随着 日龄的增加逐渐增大。原位杂交结果显示，miR—let．7主要位 于 甲状腺的滤泡上皮细胞 中，并且let．7的表达在出生后有先减少后增加的态势。通过荧光定量PCR结 果发现，在生长期随着 日龄的增加，let．7d．5p、1et一7f和let一7g的相对表达量逐渐上升，1et一7c、let一7d一3p、let． 7e和1et一7i的表达先升后降。研究结果提示，约克夏猪 甲状腺miR—let一7的表达直接或间接影响甲状腺激 素水平的变化，在 甲状腺生长发育中发挥了重要的作用，为深入研究猪的生长发育提供了一个新的思路。 关键词 miR—let一7，原位杂交(ISH)，甲状腺，甲状腺激素 ExpressionAnalysisoflet-7microRNAsinYorkshirePig’s(Sus,crof~) ThyroidatDifferentGrowthStages Ⅵ NGQj Ⅵ，ANGYun-Xia ⅥA，NGYing XUNing—Ying 1CollegeofAnimalScience，ZhejiangUniversity,Hangzhou310058，China；2CollegeofMechanics，TaiyuanUniversiytofTechnology, Taiyuan030024，China Correspondingauthors，wangying03@tyut．edu．cn；nyxu@zju．edu．cn Abstract Thelet一7familyofmicroRNAs(miR)which1Swidely1nvolvedintheregulationofdevelopment inanimaltissuesand organs，isanimportantcandidatemicroRNAsofpig’Sthyroid development．Inorder tostudytheroleoflet一7familyinthedevelopmentofYorkshirepig’S(Susscrol1)thyroidgland，firstly,we stainedpig’Sthyroidatdifferentdevelopmentalstages(105daysintheembryonicperiod，60，90，150daysin theyouthperiod)withhematoxylin—eosin(HE)stainingtodiscoverthyroidmorphologicalchange；secondly, weusedinsituhybridization(ISH)andfluo