高效液相色谱法同时测定苯巴比妥卡马西平及苯妥英钠的血药浓度.pdfVIP

312 中日友好医院学报2∞叮年第21卷第5期．k,utnd矿m胁却m F㈣hip 高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、卡马西平及苯妥英钠的血药浓度 李朋梅1，张相林1，唐毙1．商永光2 (1中日友好医院药学部，北京100029；2．天津医科大学药学院。天津300070) 苯巴比妥、卡马西平、苯妥英钠为常用的抗癫痫药物 (AEDS)。苯巴比妥对肝药酶诱导作用而影响其它药物的 萃取液提取，合并莘取液，吹干，加10C恤甲醇定容．涡旋 正常代谢，导致血药浓度降低；卡马西平在治疗血药浓度 范围内出现副作用，自身诱导代谢使得血药浓度和清除发 2．2方法的专属性 生较大变化；苯妥英钠个体差异大，非线性动力学代谢特 征主张给药个体化m。以上三种药物I临床检测的高教液相 色谱法(HPLC)测定国内报道较多嗍，但都不同程度存在平)，癫痫患者血样2(服用苯巴比妥、苯妥英钠)．按“2．1” 某些不足。荧光偏振免疫法测定成本高．本文建立高效液 项下方法操作，经HPLC分析测定得到的色谱图见图1。 相色谱法对临床样本进行测定。本文所建方法样品预处理 2．3标准曲线的制备 过程简单，测定准确，流动相呈弱酸性，色谱柱使用时间 长，峰形和分离度良好，专属性强，很适合临床监测，报告 和80m置离心管中，室温空气吹干。加空白血清1．0m1．涡 如下。 旋混合，等倍稀释配制成标准血清样品。按。2．1”项下操 1材料与仪器 1．1药品与试剂 ． 面积(Ai)对对照品溶液的浓度(c)作图。采用最小二乘法 苯巴比妥(phenobarbital，PB)(批号1222-9602)。卡马进行线性回归，回归方程和配制浓度见表1。 2．4定量限 西平(carbamazepine，CBZ)(批号0142-9503)，苯妥英钠 (phenytoinsodiilm，DPH)(批号11J0210-200401)，艾司唑 仑(estazohm，Erz)(批号1219-0102)，以上对照品均由中O．310e,／ml、0 国药品生物制品检验所提供；甲醇、乙腈和氯仿为色谱纯。 份，平均方法学回收率均在96．8～102．1％，RSD均小于 水为重蒸水。其他试剂均为市售分析纯。 10％，以此为定量限(LoQ)。其灵敏度可以满足临床治疗药 苯巴比妥对照品溶液：称取苯巴比妥对照品10．Omg．物浓度监测的需求。PB，CBZ。DPH有效治疗谷浓度分别为 置10ml量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，作为储备液，4℃15，O．-40．o眦,／ml，4．0．-．t2．0pg，“和10．0-20．ooe／ml111。 冷藏。卡马西平对照品溶液：称取卡马西平对照品 2-s回收率与精密度 50mg．置10ml量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度。作为储备 按照“2．3”项下操作，配制高、中、低3种标准血清样 液．4。C冷藏。苯妥英钠对照品溶液：称取苯妥英钠对照品 品，以当天回归方程计算得到的浓度与加样浓度比较。计 4．5mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，作为储备算方法回收率(Jl：5)；由标准血样经提取后测得的峰面积 液。4E冷藏。艾司唑仑内标溶液：称取艾司唑仑对照品 与对应浓度对照品溶液测得的峰面积之比。计箅萃取回收 3．0mg，置25玎d量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度。作为储备率(n5)。每一浓度每天平行测定5份．以获得日内精密 液．4T：冷藏。 度，连续测定3d，获得日间精密度．结果见表2。 1．2仪器和色谱条件 2．6样品稳定性 AGILENT1100系列高效液相色谱仪．JASCOUV一 按照“2．3”项下操作。配制高、中、低3种标准血清样 975检测器，AGILENT色谱工作站。KROMASIL C18(25