凝胶色谱法分离哌拉西林钠聚合物杂质.pdfVIP

凝胶色谱法分离哌拉西林钠聚合物杂质 徐会，傀静文，魏荣卿，则晓宁+，方硕 0009) (南京工业大学生物与制药工程学院色谱中心，南京21 袁耀饭，张玫 (江苏省药品检验所，南京210008) 摘要：目的：建立聚苯乙烯基质的凝胶色谱柱(MXF如pC．300)对哌拉西林钠中的聚合物杂质(或称缩合物杂质)的 林钠缩食物杂质的分离分析。 关键词；聚苯乙烯凝胶 MKF-GPC-300哌拉西林钠 聚合物杂质 缩合物杂质 1．引言 药物的安全使用涉及裂药物璇量标准的判定，因魏，准确的对药物孛造成不莨反成的穗关物质的分析、煎测缎为重 要。B一内酰胺抗生素在临床中使用广泛，主要包括青霉素和头孢菌素两大类。B一内酰胺抗擞素临床巾的主要不良反 应是速发垒过敏复痘。大霾酶实验竣及整臻实验都蠢涯甓§一蠹醮胺抗生素本身都只是拳撬篆，两其孛存在的各种聚合 物或缩合物’杂质才是引起速发型过敏反应的真正过敏原【1．3】(·：通常在本领域中将该类杂质称为“聚合物”，但从机理 及结携分子重来讲应属分子量较大约、开环或翘环憋二元或多元单体绩撺的缭会魏，嚣瑟，本文跌下兼采震蜃者)，医 此检测并控制产品中缩台物杂质的含量是减少B一内酰胺抗生素过敏反应的根本途径。 国杰外已鸯报多分裹、分辑§一内酸胺挠生素巾缠合物杂质的掇道粥；其孛色谱法是主要瓣分离分析方法，其分 离模式有三类：①离子交换模式f4j；②反相模式f5】；③凝胶色谱模式【6】。采用离子交换色谱法测定B-内酰胺抗生索中的 缩合物的报道不多，主要是在早期的报道巾，一般用于对缩会物的分离定性方蠢，且分离时同长，操作繁琐；反捆模式 邵通常使用CmCs等色谱柱，利用梯度或等度洗脱的方法对其进行分离分析，B-内酰胺抗生索的缩合物杂质按照其极 性顺序可分离如一系列峰，然而，分子量的增加并不一定会使其极性相应变化，从而馒缩合物仍不能与目标峰分离；凝 胶色谱模式是以分子筛为原理检测缩合物杂质的主要方法甄q，此种方法不需专门静杂质标准Ii矗进行对照，因此较之简 单、通用。国外对p内酰胺类抗生素缩合物杂质检测的报道主要集中在70、80年代【4’9-{{I，近年来的相关文献较少。国 外酶药舆孛仅英鬻药典1998叛使期反裙模式对弼莫谣棒殴缩合钫杂餍进行检测瞬；藿内对予彗-内蘸技抗生素静缩合物 用低压型色谱，且该凝胶粒径为40～1201un，导致该方法存在柱效低、分析周期长等缺点。 MKF-GPe．3∞型凝胶是一种剐性交联聚苯乙烯凝胶，撬藏强度嵩、抗匿缝力强，霹适矮予多种有概攘体系及采裰 体系【ls191，同时溶胀性小，且具有稳定的孔径，这给p．内酰胺抗生素与其缩合物杂质的分离提供了前提条件；并且MI：F- 凝胶柱，对B一内酰胺抗：生素哌拉西林钠及其缩合物杂质进行分离，并考察了流动相中不同因索对分离分析的影响，为 该类凝胶填料在13一痰酰胺抗生索缝合物杂质检测方嚣的应耀提供实验经验。 2实验部分 2．1主娶仪器与试裁 DIONEX 羞金项露：‘嚆鹞”项蘑(No．2007AA022200，2007AA06A402)； ’迥讯作者：E-mail：xiaoningliu@163．com； 132 PWXL色谱柱(300 体有限公司)；TSKG2500 mm×7．5mm，5vtm，TOSOH，Japan)。 哌拉两林钠(江苏海宏制药有限公司，江苏省药品榆验所提供)；乙腈，色谱纯(美国Merck公司)：磷酸二氢钠和 磷酸氯二钠，分析纯(广东汕头西陇化工厂)；醋酸铵，分析纯(国药集团化学试剂有限公司)；氢氧化钠，分析纯(国 药集团化学试剂有限公司)：氨水，分析纯(上海化学试剂有限公司)：高效液相去离子水(重庆艾科浦超纯水系统)。 2．2溶液的配制 2．2．1 O．Olmol·L．1曹酸铵缓冲液的配制：取醋酸铵0．779，加水溶解，定容至1000mL，用氨水调pH7．0。 2．2．2 的NaOH溶液调pH7．0。 铵缓冲液)定容至10mL，待测(临时现配)。 2．2．4溶剂I的配制：将0．01tool·Ld醋酸铵缓冲液(2．2．1)，用氨水调pH8．2。 23用反相Cl擅艟测哌拉西林钠样品 将截取的缩合物杂质和哌拉西林钠样品(2．