麦氏比浊仪检测布鲁氏菌病-特异性血清学SAT探讨.pdfVIP

第十六届全国卫生检验新技术学术研讨会暨展览会会刊2008年lo月26日 175 【实验室管理】 麦氏比浊仪检测布鲁氏菌病一特异性血清学SAT探讨 陈慧燕 (温州市疾病预防控制中心浙江温州325027) 布鲁氏菌病简称布病，是由一类很小的细菌称为布鲁氏 被检血清O．2ml，加入第一管中，混匀。混匀后，以该枪头吸 菌，它侵入人畜机体后引起一种人畜共患的传染病。病患出 取第一管中血清加入第二管和第三管各0．5“。以该枪头将 现高烧、大汗、肝脾肿大等症状，其最大特点为弛张热，首先出 第三管混匀，并吸取O．5nll加入第四管，混匀。再从第四管吸 现的症状是发烧，体温可达38℃一40℃，不同人发烧的热型差 取O．5ⅡIl，弃去。如此稀释后，从第二管到第五管血清稀释度 别较大。有的人体温并不太高，波动于37℃一38℃之间，持续 分别为1：12．5，l：25，1：50和l：100。 时间长，处于长期低热状态；有的人体温呈波浪状，即高热几 1．2．2．2加入抗原先以O．5％石碳酸生理盐水将抗原原液 天，体温降下来几天，又开始高，反复多次，所以布病又称浪状 作适当稀释(一般是作1：10稀释)。稀释后的抗原加入各稀释 热。还有的体温忽高忽低，早晚变化大，病情凶险，呈弛张性 的血清管(第一管不加，作为血清对照)，每管加0．5IIll，混匀。 发热等等。当前主要是长期低热者多。 加入抗原后，每管总量lITd，血清稀释度从第二管至第五管分 本菌生长对营养要求较高，目前实验室研究多用牛、羊新 别为l：25，l：50，1：100和1：200，从第一管再吸出0．5Inl，剩 鲜胎盘加10％兔血清制作培养基，其效果较好。但即使在良 llnl。 好培养条件下生长仍较缓慢，在不良环境，如抗生素的影响 1．2．2．3对照阴性血清对照，血清稀释后加抗原(与被检 下，本菌易发生变异。当布鲁氏菌壁的脂多糖(Ⅱ丐)受损时布 血清对照相似)。阳性血清对照，其血清稀释到原有滴度，再 鲁氏菌菌落即由S型变为R型。当胞壁的肽聚糖受损时，则 加抗原，抗原对照，适当稀释的抗原加石碳酸盐水。 布鲁氏茵失去胞壁或形成胞壁不完整的L型布鲁氏菌。这种 1．2．2．4判定标准比浊管制备：每次试验须配制标准比浊 表型变异形成的布鲁氏菌可在机体内长期存在，当环境条件 管作为判定的依据。配制方法是：取本次试验用的抗原稀释 改善后再恢复原有特性。对于病原学诊断，分离培养需要7一 液5一lOml，加入等量的0．5％碳酸盐水作倍比稀释，按表l 14d时间．而且布鲁氏菌生长要求条件苛刻，技术复杂，检出 配制标准比浊管。 率低。目前对于布病的诊断多采用血清学试验，主要检测血 清或乳中的抗布鲁氏菌抗体。试管凝集试验(sAT)一直是许 表l标准比浊管配制 多国家布病诊断的常规血清学方法。但该法为利用肉眼观察 管号抗原稀释液(m1)0．5％碳酸盐水清亮度 标记 其混浊程度，人为因素影响较大。因此，作者利用麦氏比浊仪 对布鲁氏菌病特异性血清学检查法(SAT)进行探讨，现将结 果报告如下。 l材料与方法 1．1材料 试管凝集抗原，被检血清，O．5％的石碳酸生理盐水．加液 Madein 枪，凝集试管，温箱和试管架，麦氏比浊仪(DENsIMAT 1．2．3麦氏比浊仪比浊法标准比浊管制备同试管凝集试 byboiMerie呱ltalia ltaly s．P．A)等。 验，全部试验管对照管及比浊管充分振荡后置37℃温箱中20 1．2方法