烟粉虱内共生菌groEL基因的原核表达条件研究.pdfVIP

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烟粉虱内共生菌groEL基因的原核表达条件研究.pdf

 2005年 32 (4)             微 生 物 学 通 报 ·57 · 烟粉虱内共生菌 groEL 基因的原核表达条件研究 1 2 3 2 2 谭周进  谢丙炎  肖启明  杨宇红  冯兰香 (湖南农业大学食品科技学院 长沙  4 10 128) 1 (中国农业科学院蔬菜花卉研究所  北京  100081) 2 (湖南农业大学生物安全科技学院 长沙  4 10 128) 3 摘要 : 为了获得较多的 GroEL 蛋白, 深入研究其性质 , 对烟粉虱内共生菌 g roEL 基因表达 μ 的条件进行了研究 。结果表明: 诱导 g roEL 基因原核表达的最佳 IPTG浓度为 100 mol/L ; 在 35 ℃诱导培养 , 能够获得较高的蛋白表达量 ; 最佳诱导培养时间为 4 ~5h; 最佳诱导培 养的初始 pH 值为 80; 在振荡转速为 120 r/m in、诱导培养时间为 4 ~5h 时 , 增大接种量 , + 2 + 有利于原核基因的表达 ; 添加少量的 NH4 有利于提高 g roEL 基因原核表达的量 , 但 Ca 、 3 + + 2 + 3 + + Fe 、K 、M g 则抑制 g roEL 基因的原核表达 , 其中 Fe 抑制作用最为强烈 ; NH4 含量 过高也不利于 g roEL 基因原核表达 ; 在培养基中添加少量的葡萄糖 , 能够提高 g roEL 基因 原核表达 , 但葡萄糖含量较高时不利于 g roEL 基因原核表达 。 关键词 : 烟粉虱 , 内共生菌 , g roEL , 原核表达 , 理化因素 中图分类号 : Q93936  文献标识码 : A   文章编号 : (2005) Stud ies on the Prokaryotic Expression Cond ition s of groEL from Endosym b ion ts in B em isia taba c i 1 2 3

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