细胞有丝分裂马达蛋白的化学生物学研究与展望.pdfVIP

小分子探针为研究多个驱动蛋 白调控细胞增殖活动 3 Eg5抑制剂的转化医学 中涉及到的各种信号转导途径的作用机制提供 了有 微管是有丝分裂纺锤体构建的关键蛋 白复合物． 效手段及技术平台． 改变微管动态性的化学小分子(如紫杉烷类和长春碱 根据有丝分裂过程 中剧烈 的细胞形态学变化， 类)已经作为特定肿瘤 的首选化疗药物广泛用于临床 哈佛大学的StuartSchreiber与TimMitchison课题组 治疗 [1,21．然而，紫杉烷类和长春碱类 的生物利用度 紧密合作创建了基于表型的小分子化合物高通量筛 及肿瘤细胞产生 的耐受性 3『促使人们寻找其他作用 选法，并发现了微管马达驱动蛋 白 Eg5的小分子化 于有丝分裂纺锤体 的新型化疗药物．作为有丝分裂 学探针Monastrol【¨及肌球蛋 白抑制剂blebbistatinE]． 重要调控分子驱动蛋 白家族引起 了人们 的极大关 利用基于细胞表型筛选方法，CENP—E驱动蛋 白抑制 注 [4】． 剂GSK923295[及Syntelin]H相继 问世．除驱动蛋 白 以 Eg5为靶标的转化医学研究展现了很高的潜 Eg5 与 CENP．E 之外 ，驱动蛋 白 MCAK，KIF4， 力，目前，共有 38种基于Eg5的靶 向药物(图2)在进 MKLP1等亦参与细胞有丝分裂的纺锤体组装及染色 行或已完成 I期或 Ⅱ期临床实验 (表 1)，其中 l7个实 体动力学过程． 验结果已经被发表 ．值得一提的是，Ispinesib对 乳腺癌患者的治疗 中得到了令人满意的初步结果 2『引， 2 驱动蛋白Eg5功能与化学生物学 虽然最终 的临床实验还未见报道．第二代 Ispinesib Eg5是一个N型马达蛋白，参与双极纺锤体形成 类似物SB一743921的作用效果令人鼓舞，我们期待基 但可能不参与其维持l1．目前 的结构模型表明，功 于 Eg5的靶 向治疗能够不断优化并与个体化评估相 能性Eg5由2个反平行的二聚体组成的反式(trans)四 结合成功地用于临床肿瘤学治疗． 聚体．在二聚体中，一对马达区域分布在棒状结构的 两端．这种结构组成使得 Eg5产生搭桥并通过正端 4 动粒马达蛋 白CENP．E的功能 移动的能力推进反平行纺锤体微管的分离．Eg5是人 CENP．E是 Cleveland课题组在寻求新的动粒蛋 类的细胞进入有丝分裂建立双极纺锤体必不可缺的 白过程中利用表达克隆法发掘的一个重要 的功能蛋 重要蛋 白．在特定的(肿瘤)细胞系中，通过RNA干扰 白I2钔‘．CENP—E蛋 白在进化过程相对保守，普遍存 (RNAi)敲低 Eg5蛋白或抗体注射干扰 EG5的功能均 在于后生代的真核细胞[25,26]．CENP—E是一个分子量 导致纺锤体检验点的激活、有丝分裂阻抑及随后的细 大约为 312kD 的蛋 白，其 N端有一个马达区域，具 胞死亡…】．Eg5功能受到抑制所导致的有丝分裂阻断 有结合微管的能力，其蛋白 C末端还有一个具有微 在典型的单极纺锤体状态 [11,15]这种表型可在培养 管结合能力的区域．CENP—E马达蛋 白的N端与c端 的细胞观察到 ¨