马尾松树皮提取物体外抑制人大肠癌细胞生长机理初探.pdfVIP

马尾松树皮提取物体外抑制人大肠癌细胞生长机理初探※ 1 1 2 1 1 2 1 崔映宇 ，王宏斌 ，谢衡 ，伍春莲 ，彭青青 ，郑光耀 ，王金发 * （1. 生物防治国家重点实验室，教育部基因工程重点实验室，中山大学生命科学院，广州 510275；2. 广州嵩珍营养源研究所，广州 510645 ） 摘 要：目的探讨PMBE体外抑制LoVo细胞生长的作用特点和机理。方法 通过 MTT 、显微镜术、凝胶电泳和流式细胞术研究PMBE抑制细胞生长的特点和凋亡 鉴定，运用免疫组化和RT-PCR探究相关分子机理。结果 PMBE能时间-剂量依赖 地抑制LoVo细胞的体外生长；PMBE处理后，流式细胞检测发现LoVo细胞周期 阻滞于G 或S期，同时可检测到亚二倍体峰的出现，荧光镜检和透射电镜观察可 1 看到LoVo细胞的核皱缩、边集甚或碎裂，以及凋亡小体形成，其基因组经过凝 胶电泳呈现典型的梯形Ladder ；RT-PCR和免疫组化结果显示PMBE处理可上调 LoVo细胞中p53和p21基因的转录，下调Bcl-2 的蛋白表达。结论 PMBE通过上调 p53和p21 阻滞细胞周期和下调Bcl-2诱导细胞凋亡双重机制抑制LoVo细胞的体外 生长，为进一步探索相关信号传导通路奠定了基础。 关键词：马尾松树皮提取物，人大肠癌LoVo 细胞，细胞周期阻滞，凋亡 中图分类号：R 735 文献标识码：A 文章编号： Primary exploration of the mechanism of Pinus massoniana bark extract inhibiting the growth of human colorectal carcinoma cells in vitro 1 1 2 1 1 CUI Ying-yu , WANG Hong-bin , XIE Heng , WU Chun-lian , PENG Qing-qing , ZHENG 2 1 Guang-yao , WANG Jin-fa * (1. State Key Laboratory for Biocontrol and The Key Laboratory of Gene Engineering of Ministry of Education, College of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510275, China; 2. Institute of Songzhen Nutritional Resource, Guangzhou 510645, China) ※ 广东省工业攻关计划资助项目（No.2004） 作者简介：崔映宇(1968-)，男，博士，现为北京大学博士后。E-mail: yy-cui@126.com *通讯作者：王金发（1947-），男，教授，博士生导师，E-mail: lsswjf@ Tel: 020 Abstract: Aim To explore the character and mechanism of Pinus massoniana bark extract (PMBE) inhibiting the growth of human colorectal carcinoma LoVo cells in vitro. Methods MTT, microscopy, gel electrophoresis and flow cytometry were used to identify the characters of PMBE inhibiting LoVo cell growth and inducing apoptosis. Immunohistochemistry analysis and RT-PCR were used to explore the related molecular mechanism. Resul