川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.pdfVIP

中药新药与临床药理 2008年 11月第 19卷第 6期 ·445 · 川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用 李 静，马 兰，潘 悦 (哈尔滨医科大学附属第二医院，哈尔滨 150086) 摘要：目的 探讨川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织Calpain活性的影响。方法 取 Wistar大鼠40只，随 机分为假手术组，缺血再灌注组和川芎嗪组。比较各组神经功能评分、脑梗死体积、Calpain活性及凋亡细胞数。结 果 川芎嗪组与脑缺血组缺血侧皮层 Calpain活性升高，两组间有极显著性差异 (P0．01)，单纯缺血再灌注组可见 缺血周边区域 内有大量凋亡细胞 ，川芎嗪组缺血周边 区域内凋亡细胞数较单纯缺血再灌注组明显减少(P0．05)。 结论 局灶性脑缺血再灌注后 Calpain活性增强，川芎嗪可能是通过抑制脑缺血再灌注后 Calpain活性而减少神经细 胞凋亡，这可能是川芎嗪治疗缺血性脑血管病的机制之一。 关键词：川芎嗪；脑缺血再灌注；Calpain 中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：1003—9783(2008)06—0445—02 川芎为伞型科多年生草本植物川芎 (Ligusticum 每 日予腹腔注射肝素 20单位 ，以防止局部血栓形成 ， chuanxiongHort．)的根茎。味辛 、性温 ，归肝 、胆 、心 手术按无菌操作进行。 包经。有活血行气、祛风止痛之功。川芎嗪是川芎的有 1．3神经功能缺损评分D 在大 鼠大脑 中动脉闭塞 效成分之一，可人工合成 ，具有活血化瘀 、扩张血管、 (MCAO)处理后 24h内进行5分制评分。无神经损伤症 抑制血小板聚集、改善微循环 、抗氧化、免疫调节和钙 状计0分 ；提尾实验不能完全伸展对侧前爪计 1分；提 拮抗剂样的作用 ¨ 。近年研究发现，川芎嗪在脑缺血 尾时向左侧转圈计 2分 ；行走时 自发向左侧转圈计 3 再灌注损伤的治疗中显示了较好的疗效，但其具体机制 分；向对侧倾倒 ，或不能自发行走 ，意识丧失计4分。 尚不明了，本文旨在探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损 1．4脑梗死体积测定 评分后每组各取 5只大 鼠，按 伤保护作用的机制。 5mL／kg的标准注射 10％水合氯醛麻醉后，断头取 脑。观察鼠脑大体形态。去除小脑和脑干后，置一20℃ 1材料与方法 冰箱 10min，取出按 2mm间隔冠状切成 6片。置 1％ 1．1动物与药剂 成年Wistar大鼠，雌雄不拘，体重 1TrC染液中，避光 37℃恒温孵育 30rain。取出可见 ， 250～320g，由哈医大二院动物实验中心提供 ，动物合 正常脑组织呈红色 ，梗死灶为 白色，按固定比例进行正 格证号 ：scxK(黑)2006—010。川芎嗪注射液，哈尔滨 反两面拍照，Photoshop软件测定各切片正反两面的梗 三联药业有限公司，批号 ：070705A。10％水合氯醛 、 死灶面积，正反两面面积平均值乘以厚度，得出梗死灶 1％2，3，5一三苯基 四氮唑 (TTC)染色剂 、Tris—HCL 体积。 (pH=7．4)、考马斯亮蓝 G250、31一硫基 乙醇 、EG． 1．5Calpain活性测定 剩余大鼠迅速断头取脑 ， TA、 EDTA、 DT?、 Lowry 蛋 白 定 量 试 剂 盒 、 冰浴上分离出缺血侧皮层制成 10％的组织匀浆以测定 Lysocephalin均购 自Sigma公司，TURNEL试剂盒购 自 Calpain活性。将皮层组织加入 20mmol／LTris—HCl缓冲 武汉博士德公司，其余均为国产分析纯。 液pH=7．4(13一巯基 乙醇 5mmol／L、EDTA0．1mmol／L、 1．2分组、造模与给药 取Wistar大鼠40只，随机分 DTT10mmol／L、lysocephalin5mmol／L)在冰浴上用玻 为