量PCR技术在食源性致病微生物.pdfVIP

2602006,uoL27,No.04一一一一一一』围1HOME一一一一一一一一一一一 X逮 i进 定量PCR技术在食源性致病微生物 检测中的应用 杜 巍 (国家信息中心博士后科研工作站，北京 100045) 摘 要:食源性致病微生物是影响食品质量和安全的主要因素之一，建立和完善食品中致病微生物快速定量检测 技术具有重要的现实意义。定量PCR能快速、敏感、特异而准确定量，深入有效地利用该技术，必将有力促进 食源性致病微生物快速检测工作的发展。 关键词:定量PCR;致病微生物;快速检测 ReviewonApplicationofQ-PCRontheDetectionofFoodbornePathogenicMicroorganism DU Wei (StateInformationCenterPostdoctorScienceandResearchWorkstation,Beijing 100045,China) Abstract:Foodbomepathogenicmicroorganismwasoneoftheimportantfactorsthatcouldaffectthequalityandsafetyof food.Itwasbeenofrealisticsignificancethattherapiddetectiontechnologyoffoodbornepathogenicmicroorganismshouldbe designedandcosummated.Q-PCRwasrapid,sensitive，specificandaccurateforquantitativedeterminationtechnology.Ifitcould beeffectivelyutilized,therapiddetectionoffoodbornepathogenicmicroorganismwouldmakeobviousprogress. Keywords:quantitativepolymerasechainreaction(Q-PCR);pathogenicmicroorganism;rapiddetection 中图分类号:0819 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)04-0260-04 由沙门氏菌、弯曲菌、大肠埃希氏杆菌、李斯特 用研究重点，并作为食品中致病微生物快速定量检测研 菌等食源性致病微生物引发的食品污染，是影响食品质 发的一项关键技术。 量和安全的主要因素之一。因食源性致病微生物污染食 定量PCR的基本原理 品所导致的食源性疾病不仅会严重损害人体的健康，而 且很容易引起食品贸易纠纷川。随着现代食品安全控制 PCR(聚合酶链式反应)反应的基本原理为:在体外 技术如危害分析关键控制点(HACCP)、微生物危险性评 利用DNA聚合酶活性，在引物的引导和脱氧核糖核普 估(microbiologicalriskassessment,MRA)的发展，以 酸((dNTP)等参与下将模板DNA在数小时内进行百万倍扩 及依据MRA建立的食品中致病微生物的限量标准等要 增。该酶促反应最基本的3个环节是:①模板DNA的 求，建立和完善食品中微生物快速定量检测技术越来越 变性，即在94℃下模板双链DNA变为单链DNA;② 具有重要的现实意义。 引物与模板链的特异性复性;③引物链的延伸。 聚合酶链式反应((PCR)技术问世20年来，在生物学 定量PCR(Q一PCR)就是在PCR反应中应用化学标记 基础研究领域得到了巨大的发展和完善，目前在疾病诊 的引物或探针，对扩增的标记产物进行定量2-‘41。近年 断、病原体检测等方面也有了越来越广泛的应用。近 来