葡聚糖硬脂酸嫁接物的合成和其作为药物载体行为研究.pdfVIP

葡聚糖硬脂酸嫁接物的合成及其作为药物载体行为研究 翁旗、杜永忠‘、袁弘、胡富强 浙江大学药学院药物制剂研究所 摘要：目的：合成葡聚糖硬脂酸嫁接物(Dex．SA)，考察嫁接物及其载阿霉素胶团 (Dex．SA／DOX)的理化性质及体外抗肿瘤活性。方法：利用酯化反应合成Dex．SA， 核磁共振分析、芘荧光法、动态光扫描法等考察嫁接物及其胶团的理化性质，透析 法制备Dex．SA／DOX，考察载药胶团载药能力，体外控释药物能力以及体内外抗肿 瘤活性研究。结果：Dex．SA能在水性介质中自聚形成胶团，随着葡聚糖分子量的 改变和硬脂酸投入量的变化，所形成胶团的理化性质呈现规律性的变化，物理包裹 阿霉素后的载药胶团载药能力良好，能控制释放药物至48小时，体内外抗肿瘤活性 较游离阿霉素药物有了较显著的提高。结论：Dex—SA嫁接物胶团作为抗肿瘤药物 载体可提高药物的疗效、降低毒副作用。 关键词：葡聚糖、硬脂酸、聚合物胶团、阿霉素、抗肿瘤活性 1． 引言：胶团是一类胶体型药物载体，具有独特的核．壳结构，其疏水性内核提 供疏水性药物储库作用，亲水性外壳有利于胶团在水性环境的稳定性，通过主动 或被动的方式实现药物的靶向给药‘11。本研究拟利用具有良好生物相容性的葡聚 糖(Dex)的羟基和硬脂酸(SA)的羧基结合，将SA嫁接到Dex主链上形成不 同分子量的葡聚糖嫁接不同比例硬脂酸的葡聚糖．硬脂酸嫁接物(Dex．SA)，以 阿霉素为模型药物，考察Dex．SA胶团载药能力和体内外抗肿瘤活性。 ： 2．材料与方法 BASIC 2．1．材料：葡聚糖(MW=10k，20k，40kDa，BIOINC．)，．硬脂酸(温州 Chem．Co， 市化学用料厂)，二甲基亚砜(无锡海硕生物有限公司)，芘(Aldrich USA)，阿霉素(浙江海正药业有限公司)，4．二甲氨基吡啶(ShanghaiMedped ● Co．，Ltd．)，异硫氰酸荧 Co．，Ltd．)，N，N’．二环己基碳二亚胺(ShanghaiMedped 光素(Sigma)，其余试剂均为分析纯或化学纯。 2．2．方法：以4．二甲氨基吡啶为催化剂，N，N’．二环己基碳二亚胺为脱水剂，酯化 反应合成嫁接物Dex-SA。核磁共振和红外光谱分析确认合成产物化学组成和修 饰比例。芘荧光法比1测定临界胶团浓度，微粒粒度与表面电位测定仪测定胶团 粒径大小。以阿霉素为模型药物，透析载药法制备Dex．SA／DOX，荧光分光光度 法测定其载药量和包封率，并考察其体外释放药物行为特征。以FITC标记聚合 物载药胶团后用荧光倒置显微镜观察其细胞摄取行为，采用四唑盐比色法玛1和 模型动物肿瘤大小测定评价其抗肿瘤活性。 3．结果与讨论 3．1．Dex．SA嫁接物的合成及理化性质评价：利用Dex羟基和SA羧基之间脱水 酯化反应合成不同葡聚糖分子量和SA接枝率的Dex．SA，核磁共振图谱和红外 图谱确认葡聚糖与SA的化学嫁接和纯度；TGA研究结果表明，葡聚糖的SA修 饰不影响其热稳定性；随着葡聚糖分子量的减小或SA接枝率的增加，Dex．SA 形成胶团的能力增强，且所形成的胶团具有较小的粒径；细胞摄取研究结果表明 Dex．SA胶团具有肿瘤细胞快速摄取能力。 3．2．Dex-SA／DOX的制备与理化性质评价：以阿霉素为模型药物的载药研究结果 显示，聚合物胶团具有良好的药物负载性能，载药胶团的粒径小于100rim，粒径 分布均匀，体外控制药物释放长达48小时以上，药物释放速率与Dex．SA的葡 聚糖分子量和SA的接枝率，以及载药量有关。 3．3．Dex-SA／DOX的体内外抗肿瘤活性：体外的细胞毒性研究结果表明：Dex．SA 胶团具有较小的细胞毒性；载药胶团对人乳腺癌细胞和耐药细胞的毒性基本相 当，体现出逆转肿瘤细胞耐药的特性，这可能与药物经Dex．SA胶团的靶向输送 有关。模型动物的抗肿瘤活性研究结果显示：Dex．SA／DOX与市售制剂相比，可 提高药物的疗效，增强模型动物的药物耐受性。 4．结论 葡聚糖硬脂酸聚合物(Dex．SA)胶团，作为疏水性抗肿瘤药物载体，可提高抗 肿瘤药物的疗效和模型动物的耐受性。 致谢 的经费资助。