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第八届中国林业青年学术年会论文集 分2：林木育种与生物技术 分子生物学技术在中药鉴定中的应用 安 睿 (黑龙江省森林与环境科学研究院，齐齐哈尔161005) 摘要分子生物学是～门从分子水平上研究生命现象的科学，它是由生物化学，遗传学和微生物学等科学 融会发展而派生出来的边缘学科。应用分子生物学技术分析中药材的化学成分和物理特性已被应用于中药 材的鉴定中，并且这种技术在不断的深入和完善。我国中药材种类繁多，资源丰富。但来源复杂，品种混淆严 重。绝大多数中药的作用机理不清是限制中国中药业走向世界的一个重要因素。分子生物学和基因工程技 术的日趋成熟，已在中药质量鉴定研究中展示出了良好的应用前景。本文主要从电泳技术、免疫技术、DNA 分子遗传标记技术三个大的方面阐述分子生物学技术在中医药鉴定中的应用和发展，希望能对中国中医药 产业的发展有所贡献。 关键词分子生物学中医药电泳免疫遗传标记 中药鉴定技术特别是中药原材料的鉴定在中药生产中起着至关重要的作用。原材料的真伪、质量 的好坏不但决定着中成药的等级和疗效，而且从长远方向来看它直接影响人们对中药的信任程度和中 药的发展。中药传统上是用经典的形态分类学和解剖学特性，从基原、性状、显微及理化等方面进行 药材品种的鉴别，这些方法简便易行，但对一些已失去其原本性状的药材，像局部入药的动物药材、 经过多道工序炮制加工后的药材或是道地药材等的鉴别，就难辨其真伪，更难分辨其品质的优劣，更 为甚之的是一些珍贵的用传统方法难以鉴别的中药材出现了严重造假现象。这就需要一种新的鉴定技 术来解决这些问题。 随着科技的进步。通过分析中药材的化学成分和物理特性鉴定中药材的技术逐渐走向成熟。随之 发展起来的分子生物学技术也逐渐被应用到中药的鉴定中去，并在一定范围内取得了良好的效果，正 渐渐的发展成为一项准确、有效的鉴定技术。 用分子生物学技术鉴定中药材主要有三种技术：1)电泳技术；2)免疫技术；3)DNA分子遗传 标记技术。 1 电泳技术 带电荷的粒子在电场中随缓冲液定向泳动称为电泳。电泳技术是利用药材中不同组分的电荷性 质、电荷数和分子量的不同，以及在电场中运动速度、方向的不同，结合染色技术从而达到鉴别的目 的。中药材中含有多种组分，如有机酸、蛋白质、多肽氨基酸、生物碱和酶等，其电荷性质、电荷数 和分子量各不相同。在同一电场作用下，经一定时间，各组分泳动的方向、速度和距离也不相同，结 合谱带条数和染色不同而达到鉴别的目的。目前已被广泛应用于中药材的鉴别中。 应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术，能起到准确鉴别苋科种子药材的目的(赵华英等，2000)， 2免疫技术 免疫技术的依据是不同种的动物均含有特异性蛋白质，这些蛋白质的表面氨基酸都有一小部分决 定或控制抗原、抗体特异性反应的抗原决定基，也就是具有免疫特异性。利用免疫反应可以鉴别出动 物药的基原。 免疫技术适用于动物药材的鉴别，尤其是亲缘关系比较接近的动物药间的鉴别。 目前可用于鉴别某些鹿心(郭月秋等，2000)，利用抗虎血清可以鉴别虎骨(冯振波等，1992)。 王42 第八届中国林业青年学术年会论文集 分2：林木育种与生物技术 3DNA分子遗传标记技术 每个物种都由特殊的基因组成，DNA分子作为遗传信息的直接载体，既不像化学成分一样受外界 因素的影响，也不像形态、血清学特征一样受生物体发育阶段和器官组织差异的影响，而是每一个体 的任一细胞均含有相同的遗传信息。通过提取物种的遗传物质一一DNA，经过技术处理就可以达到准 确鉴定物种的目的。 卫星DNA、扩增片断长度多态(AFLP)和毛细管PCR。 RAPD或AP．PCR是利用一系列不同的随机排列的寡核苷酸链作为引物，对研究对象的基因组 材的不同基原。 台北医学院利用RAPD技术成功检测出玉屏风散中的白术、黄芪和防风3味药材(范俊安等， 蒲公英、黄连、山麦冬、乌梢蛇、冬虫夏草、野生人参、党参、细辛等中药的工作。日本学者运用RAPD 技术分析的中药有当归、甘草、淫羊蕾、苍术、白术、紫苏、假人参、竹节参及人参与西洋参杂交子 组DNA，实验结果表明RAPD分析方法不仅可以区分人参与其他药材还可以鉴定人参制剂的中药品 种(葛皓玲，2003)。 钱白