应用免疫固定电泳在骨质疏松症鉴别多发性骨髓瘤中应用.pdfVIP

第六届上海市医学会骨质疏松学术年会论文汇编·大会交流 应用免疫固定电泳在骨质疏松症鉴别多发性骨髓瘤中的应用 甘洁民朱汉民 复旦大学附属华东医院 多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是浆细胞恶性肿瘤性疾病，增生的浆细胞侵润以及所生成的 产物可引起一系列器官功能障碍，临床多有骨痛、溶骨损害、贫血、肾功能不全、高钙血症等表现，经常与 骨质疏松症和其它骨代谢疾病混淆。多发性骨髓瘤的免疫化学异常蛋白定量分析缺乏相应的特异性，故常 造成漏诊或或误诊。本文应用免疫固定电泳技术运用血清蛋白电泳和免疫沉淀两个过程操作，对多发性骨 髓瘤患者血清的各类免疫球蛋白及其轻链进行分型，以指导临床诊断和治疗。 材料和方法 1．血清样本：选择按国家现行标准诊断为多发性骨髓瘤患者50例，其中男性2l例女性29例，年龄 51．79岁。空腹采集静脉血，两小时内分离血清，然后进行免疫固定电泳。 2．仪器和试剂：法国Sebia Hydrasys半自动电泳分析系统和原装配套试剂进行血清蛋白电泳和免疫固 定电泳。采用日立7600全自动分析仪用罗氏公司的试剂检测免疫球蛋白A，免疫球蛋白G和免疫球蛋白M。 行电泳以分离蛋白质。(2)免疫固定：加抗血清，在每份样品的6个泳道上分别加固定液10ul，然后再加 液，移去加样模板，再用厚滤纸覆盖于凝胶板上吸去表面的固定液和水份，65℃烘干6分钟。(4)染色和 脱色：将烘干的胶片置于右侧的染色缸中，结晶紫染液染色，然后用O．5％柠檬酸脱色液进行脱色。(5) 读片：将烘干的胶片取出，观察和判读结果。 结果 50例患者血清蛋白电泳均呈现颜色深浅不同的M蛋白峰，进一步进行免疫固定电泳分型，结果显示： IgG型28例， 单纯性的九轻链3例，单纯性的K轻链l例。血清免疫球蛋白定量检测结果：IgG型中有27例IgG升高， 含量异常增高而另一种轻链含量则明显下降或正常。在4例单纯轻链病患者血清中其免疫球蛋白IgG、IgA、 M含量均降低。 Ig 。 讨论 多发性骨髓瘤是M蛋白疾病中的一种，M蛋白疾病是由于单一克隆浆细胞无限增殖产生的均一单克 隆蛋白所导致的一组疾病。分为恶性和良性两大类，前者有多发性骨髓瘤、浆细胞瘤、恶性淋巴增殖性疾 ‘ 病、重链病等，占80％左右，后者占20％左右。 轻链病是随着免疫学的发展而发现的多发性骨髓瘤的一种类型，是异常的浆细胞在产生轻链与重链时 失去平衡，使轻链生产过剩所致。轻链病典型的免疫化学特点是；浓缩尿中有游离轻链，血清中常有轻链以 第六届上海市医学会骨质疏松学术年会论文汇编·大会交流 及低丙球蛋白血症，其临床表现与多发性骨髓瘤相似，有研究报道轻链病更易引起肾脏损害。荧光免疫检 查发现患者肾小管上皮细胞内有轻链存在，因此强调治疗时应重视保护肾脏。 免疫固定电泳是日前诊断多发性骨髓瘤最实用、最有效的技术，它有良好的特异性和灵敏度，诊断符 合率高，可直接进行分型，对多发性骨髓瘤的实验室诊断特别是轻链病的诊断具有重要价值。 补肾方通过调节骨I型胶原代谢改善骨基质结构 提高骨强度的机理研究 王翔赵咏芳郭海玲徐宇詹红生 上海中医药大学附属曙光医院上海市中医研究院骨伤科研究所上海201203 【摘要】目的：本研究利用切卵大鼠骨丢失动物模型，通过观察补肾方对骨内I型胶原合成与分子交 联形成的影响，探讨补肾方改善骨质量、提高骨强度的胶原调控机制。方法：建立卵巢切除大鼠动物模型， 运用骨骼影像学、骨组织病理学和骨生物力学等技术与酶联免疫吸附法观察补肾方对骨丢失大鼠骨密度、 骨代谢、骨生物力学性能和骨结构的影响，同时利用蛋白印迹免疫法、实时荧光定量聚合酶链式反应等分 骨钙素基因表达的影响。结果：补肾方能够对抗因雌激素缺乏导致大鼠骨量的丢失，骨结构的恶化和骨生 物力学的减退，与福善美组比较无统计学差异；同时补肾方还能够改善骨内I型胶原交联形式的组份，并 且在蛋白水平和基因水平上调I型胶原的表达；抑制因雌激素不足