高山大黄的显微及分子鉴定研究.pdfVIP

世界中医药 2015年2月第 10卷第2期 ·261· -_． 1 tj 同山大黄的显微及分子鉴定研究 费 烨 付深振 吴浩忠 李启恩 多吉任青。 陈 静 闰兴丽 魏胜利 高增平 (1北京中医药大学中药学院，北京，100102；2兰州大学生命科学学院，兰州，730000；3西藏藏医学院，拉萨，850000) 摘要 目的：对蓼科药用植物高山大黄进行显微及分子鉴定研究。方法：采用石蜡切片、粉末制片对高山大黄根及根茎的 横切面组织结构和粉末特征进行显微研究，并采用matK基因序列分析技术对高山大黄进行 了分子鉴定研究。结果：高山 大黄根横切面中皮层宽，薄壁细胞 中可见草酸钙簇晶，木质部宽广，导管径向排列；根茎髓部宽广，无异形维管束存在；粉 末中草酸钙簇晶多，棱角大多短钝 ，导管木质化，多网纹导管，淀粉粒小而多。高山大黄matK序列全长 l524bp，在基因 上游 106、218、222、365、522、615、7ll、759、801、852处存在十处碱基替换 ，且在950—955处存在CAAGAA6个碱基插入。 结论 ：本研究获得 了高山大黄比较全面的鉴定信息，上述显微特征可作为高山大黄显微鉴定依据，其matK基因序列分析 为高山大黄DNA条形码研究奠定基础。 关键词 高山大黄；显微鉴定 ；分子鉴定 M icroscopicandMolecularIdentificationofRheum Nobile FeiYe’， FuShenzhen，WuHaozhong，DuojiRenqing，ChenJingYanXingli，WeiShengli，GaoZengping (1SchoolofChineseMateriaMedica，BeijingUniversityofChineseMedicine，Being100102，China；2SchoolofLfieSciences， LanzhouUniversity，Lanzhou730000，China；3TibetanTraditionalMedicalCollege，Lhasa850000，China) Abstract Objective：ToperformastudyofthemedicinalherbalmicroscopicandmolecularidentificationofRheumnobileradix andrhizome．Methods：ThecrosssectionsofRheum nobileradixandrhizomewereobtainedbyusingparaffinsectioning，andtem— poraryglyceroltabletswithchloralhydratewereusedtoidentifythemicroscopicstructureofpowder．ThematK genesequenceanal— ysistechniquewasusedformolecularidentificationofRheum nobile．Results：Inthecross-sectionofradix，boththecortexandxy— lemwerewidewithvesselsarrangingradiallyandmassivecalcium oxalatecrystalvisibleinparenchymacells．Pithpartwasbroad withoutanyabnormalvascularbundle．Powdercontainedamassofcalcium oxalatecrystalswhoseedgesweremostlyshortblunt． Therewerelignifiedvesselsandsmallstarchgrainaswel1．ThelengthofmatK genesequenceofRheum nobilewas1524bp．Up— stream ofmatK sequence，thereweretenbase-pairsubstitutionsin106，218，22