基于大体积循环进样的低丰度蛋白质富集.pdfVIP

20l4 l‘l1JJ 色巳 谱1旨 Vo1．32NO．11 Novem ber20l4 ChineseJournalofChromatography l271～1274 技 术与应用 DOI：1()3724／SP．J．1I23．2014．09019 摘要 ：发腱 r一种火体私{循环进样 法‘，J}j于寓集低干 r{质。存优化的色瀚分离条什 卜，通过增加蛋 rl质样 品 的f样体积提高低 r度蚩 白质 的绝刈 ：l={；进 ·步采川增JJJ1样r进样衙环次数的厅法提高蛋 内质 的富集效率 以 月1=提取货 白质为仟 ，每次 I样址 500 L的大体{=I{11次循环进样 ．根据色谱峰的俯 强弱，选择 了 原始i}f l划rfr 到色谱峰 、 较少小峰和 r较多小峰}I|观 的l1f『川段等有代丧 的馏分进行研究 中等极性 的纰分 l1J， J【I『为 l1．38rain和 l2．58rain 分的寓浆效率分}jIJ提高 了52俯和 6l倍 ，实验结 j理论寓集效率柑i近 所，皮 的 法为 物 r1质样 品研究挺供_r一种新的 架制箭及榆测 法‘、 关键词 ：人体积进样 ；衙环 ；篮门质 ；低 发；猪肝 ；寓集 中图分类号 ：0658 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—87l3(20l4)1l_1271—04 Abstract：Biologicalproteins havegreatdifferences in size，hydr0phobicity，pH and relative abundance．Especially，the relative contents ofhigh—abundance proteinsand low abundance proteinscanreach 1lordersofmagnitudeormore inblood．However，thecontentsofproteins whichhaveanimportantimpactonthebiologicalfunctionandhaverelatedtoniajordiseases areusuallyverylow inbodyfluidsortissues．So，itisvery meaningfulto detectthelow abun— danceproteinsinbiologicalsamples．A methodoflargevolumerecyclinginjectionwasdevel— oped asanew sampleenrichmenttechnology in thisstudy．The low absolute contentsofpro— teinsin asamplewereimprovedbyincreasingthevolumeofsample，and theenrichmenteffi— ciencywasalsoincreasedwiththeadditionofinjectiontimes．Withtheporkliverproteinasan exam ple，undertheoptimized conditions，therepresentatiVe contentswhich werenopeaksor littlepeaksandmorepeakswith low signalswerestudied．Thecontentsofpeaksatthereten— tiontimesoflI．38rainand12．58minwereenrichedby11timeinjectionsof500LLLeachtime． Theenrichmentfactorsrespectivelyreached 52and61whichwereclosedtotheoreticalvalues． Thismet