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体外消化法评定饲料营养价值的研究进展 叶宏涛刘国华 (中国农业科学院饲料研究所，北京，100081) 对各种饲料的营养价值进行准确评定是配制日粮的关键。众所周知，评定饲料的营养价值的方法主要有 化学分析法、体内法和体外法。化学分析法是评定饲料营养价值的一种常用方法，如总能、总磷、粗蛋白， 粗纤维和粗脂肪等测定方法。但利用概略养分分析所测得的饲料养分与动物消化吸收养分间存在很大差异， 不足以准确地反映出饲料的实际营养价值。利用动物试验能够比较准确地对饲料营养价值进行评定，但这些 方法往往耗时、费力，很难在短时间内对大量的饲料样品进行评价分析，且生物学影响因素多，结果变异较大， 重复性差，限制了其实用性。因此，人们建立了体外法来研究饲料的营养价值。随着技术的进步和动物消化生 理的研究进展，利用动物体外消化模拟技术来研究饲料的营养价值也成为可能。体外法具有简单、快捷、重 演性好等特点，在饲料营养价值评定等方面占有重要地位。本文就体外法在不同动物上的应用状况，应用中 存在的问题及应用前景作以综述，以提高对体外法的认识和重视。 1体外；肖化在猪上的应用 由于猪个体较大，体外消化所需要的一些消化酶，如胃蛋白酶和胰酶以及小肠液等比较容易获得。而且 一次性获得数量也比较大。因此，体外消化法在猪上的研究和应用较多。 猪体外消化法有pH法、单酶(比如胃蛋白酶)法、两步法(胃蛋白酶一胰酶法)、三步法(胃蛋白酶 一胰酶一碳水化合物法)等，它们都能很好地预测猪饲料的体内消化情况。 变，并记录所用NaOH数量。利用该方法所测定的在对31种植物性蛋白质饲料和11种动物性蛋白质饲料体 定时发现，用胃蛋白酶在pH=1．5的条件下处理饲料样品，有机物质体外消化率与体内消化率相关系数很 分离已消化养分与残渣时，先利用三氯乙酸将可溶性肽和蛋白质沉淀出来，然后用测定纤维的标准过滤器过 的改进和完善，并成功地利用改进后的体外消化模拟方法预测了猪体内蛋白质和氨基酸的回肠消化率。 料的体外有机物质消化率与猪体内消化能之间存在线性相关(R2=0．94)。这表明利用胃蛋白酶一胰酶一碳 水化合物酶三步法能够预测猪饲料的消化能。 2体外消化在鸡上的应用 由于鸡个体较小，操作和手术有诸多不便，有关针对鸡体外消化模拟技术的研究报道较少，对鸡饲料的 疆162 技术篇 众多体外评定中，大多是以猪作为研究对象，所采用的参数均以猪体内参数作为参考，体外消化模拟程序也 李文英等，1990)。 试验表明利用猪体外消化模拟操作方法和采用猪的内源消化酶能够用来估测鸡体内养分消化率，Bedford 等(1973)以猪胃蛋白酶和胰酶为消化酶源，在与鸡消化道内pH接近的条件下，通过对不同的胃蛋白酶和 胰酶水平以及消化时间对食糜粘性的影响，确立了一套适合于鸡的体外消化操作方法。该方法成功地对饲喂 加酶麦类日粮肉仔鸡小肠食糜粘性和体增重进行了准确的预测。李小亭(1989)采用PIF冻干粉代替鸡小肠 液进行饲料离体消化率和消化能测定，结果表明，离体法测定值和生物学法测定值间存在正相关，相关系数 在0．862以上，达到极显著水平(尸t印．刃)。 近年来小肽营养理论成为研究热点，鸡体外消化法首先用来研究蛋白质原料的体外释放情况，评定蛋白 质原料的品质。施用晖等(2001)报道，通过应用胃蛋白酶一胰酶两步体外消化法测定6种豆饼(粕)、3种 鱼粉、菜籽饼、玉米蛋白粉、肉粉、蚕蛹、酪蛋白等14种蛋白质饲料的寡肽释放量，并研究了它们与蛋白质 质量和氨基酸组成间的关系。王丽娟等(2004)报道，通过应用胃蛋白酶一胰蛋白酶法，对4种饲料(鱼粉， 豆粕、棉粕和菜粕)进行体外消化，研究体外消化过程中不同饲料的寡肽释放特点与其氨基酸组成的关系。 以上体外法在鸡的应用说明利用来自于猪的消化酶模拟鸡体内消化过程是可行的。虽然利用猪体外消化 模拟操作方法和采用猪的内源消化酶能够用来估测鸡体内养分消化率，但还不能够完全替代鸡的消化参数和 酶谱。猪与鸡毕竟在消化生理方面存在着很大差异，如消化道pH、食糜在消化道内的停留时间、消化酶分 泌水平和酶谱以及这些酶催化反应的适宜条件等均有所不同。因此，有必要对有关鸡体外消化模拟技术中的 参数和消化酶活的组成研究确定。Zyla等(1995)以火鸡为试验动物，实际测定了火鸡嗉囊、胃和小肠内食 糜pH作为体外消化pH参数，不仅对胃