【创新设计】2014-2015学年高二生物人教版选修1活页规范训练：5-2 多聚酶链式反应扩增DNA片段.docVIP

课题　 (时间：30分钟　满分：50分) 考查知识点及角度 难度及题号 基础 中档 稍难 PCR原理及其与细 胞内DNA复制的比较 1、2、3 6 PCR操作程序 5 8 PCR各轮反应特点 4 7 　　　　　　　　　　　　　　　　　 一、选择题(每小题4分，共20分) 1．PCR技术扩增DNA，需要的条件是(　　)。 ①目的基因　②引物　③四种脱氧核苷酸　④DNA聚合酶等　⑤mRNA　⑥核糖体 A．②③④⑤ B．①②③⑥ C．①②③④ D．①③④⑤ 解析　PCR技术需要目的基因作为扩增的模板，DNA聚合酶催化反应的进行，而引物是满足DNA聚合酶起作用的需要，四种脱氧核苷酸是该过程的原料。 答案　C 2．下列有关PCR反应的叙述正确的是(　　)。 A．PCR反应所需要的引物只是RNA B．PCR反应所需要的材料是核糖核苷酸 C．PCR反应所需要的酶在60 ℃会变性 D．PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行 解析　PCR反应需要的引物是DNA或RNA，反应所需要的材料是脱氧核苷酸，PCR所需要的酶是耐高温的，在60 ℃不会变性。 答案　D 3．下列各项属于引物作用的是(　　)。 A．打开DNA双链 B．催化合成DNA子链 C．使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制 D．提供模板 解析　DNA分子的复制具有方向性，即只能从子链的5′→3′方向进行复制。当引物与DNA母链结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链。所谓3′、5′是指脱氧核糖上C原子的位置。脱氧核糖的结构图如上图所示。答案　C 4．PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时(　　)。 A．仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸 B．与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸 C．同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸 D．无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链 解析　考查同学们对PCR反应中的变性、复性、延伸的实质是否理解。当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物固定端为5′端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即与引物Ⅱ结合延伸DNA子链。 答案　B 5．PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，它调控不同温度的目的是(　　)。 ①95 ℃，使DNA分子变性，失去生物活性　②95 ℃，使DNA分子变性，解开螺旋　③55 ℃，使DNA分子开始复制、延伸 ④55 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性　⑤72 ℃，使DNA分子开始复制、延伸　⑥72 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性 A．①③⑤ B．②③⑤ C．②④⑤ D．②④⑥ 解析　PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解旋与结合。PCR仪实质上是一台能够自动调控温度的仪器。当温度上升至95 ℃时，DNA分子变性，解开双螺旋结构；温度下降到50 ℃左右(55 ℃)，引物与DNA单链结合，DNA恢复双螺旋结构，恢复活性；温度上升至72 ℃，DNA分子开始复制、延伸，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 答案　C 二、非选择题(共30分) 6．(14分)PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种TaqDNA聚合酶。 (1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用________。 (2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。 ①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？ __________________________________________________________。 ②TaqDNA聚合酶的功能是______________________________________。 ③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用________法和________法进行分离。 ④为了使TaqDNA聚合酶能够多次反复利用，可采用______技术，常用的方法为____________________________。 (3)从土壤中分离分解尿素的细菌时，应采取的措施是________，原因是__________________________________________________________。 (4)相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。 ①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是：________、________。 ②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？为什么？____________________________________________________________ ____________________________