生物与胞外聚合物偶联降解石油污染土壤中常见有机物.pdfVIP

第33卷第12期 (2014．12)(试验研究) 生物与胞外聚合物偶联降解石油污染土壤中常见有机物 杨智临 李亚龙 白智勇 王士东 杨琦 中国地质大学 (北京)水资源与环境学院 摘要：将石油污染土壤中筛选出来的专一性降解萘茵株Rhodococcus、专一性降解菲茵株 Nocardioides与胞外聚合物 (EPS)联用，对石油污染土壤中常见的两种难降解有机物萘、菲的 降解规律和动力学与茵株的生长曲线进行研究。实验结果表明，EPS与萘降解茵联用吸附降解 萘的最佳萘初始投加量为2．14mg／L，最佳pH值为6，最佳温度为3OoC；EPS与菲降解茵联用吸 附降解菲的最佳菲初始投加量为0．06mg／L，最佳pH值为6，最佳降解温度为20。C。EPS与茵株 联用对萘的去除率达96％时，菲的去除率达1O0％。 关键词：石油；胞外聚合物；萘、菲；降解 doi：10．3969／j．issn．1006—6896．2014．12．007 将石油污染土壤中筛选出来的专一性降解萘菌 15min，上清液用滤膜过滤，得粗EPS后以O．45 m 株Rhodococcus、专一性降解菲菌株Nocardioides与 滤膜过滤，再放人4。C冰箱保存备用。 胞外聚合物 (EPS)联用 ，对石油污染土壤中常见 1．4 降解实验 的两种难降解有机物萘、菲的降解规律和动力学与 250mL血清瓶中含有定量萘或菲、2mL菌悬 菌株的生长曲线进行研究。 液、2mL的EPS，并且加入216mL无机盐 ，使液 体体积达到220mL。密封瓶 口后放人恒温水浴摇 1 实验与方法 床中开始实验 。取样时刻为0、0．5、2、4、8、 1．1 试验试剂与仪器 12和24h。 仪器 ：立式 自动 电热 压力蒸 汽灭 菌锅 (LDZX一40CI，上海 申安 )、恒温水浴振荡器 2 结果与讨论 (SHA—B，国华)、分析天平 (FA1004，上海精 2．1 菌对萘、菲的降解 科)、分光光度计 (722s，上海精密科学仪器)、高 (1)EPS与萘降解菌耦合降解萘。初始条件 ： 速冷冻离心机 (GL一2OM，上海卢湘)、液相色谱 EPS的投加量为42mg／L，萘的初始浓度为6mg／L， 仪 (1525，Waters)等。 pH值为7，菌悬液接种量为l％，转速为150r／min。 材料 试 剂 ：萘 (育才 精 细化 工 )、菲 以时间 (t)为横坐标 ，初始浓度／当前时刻浓度 (JKCHEMICA)、牛 肉膏 、蛋 白胨 (均为奥博 (c／c)为纵坐标做图，在不同温度条件下菌种对萘 星)、无机盐等 ，无机盐及微量元素配比成分参见 的降解如图1所示。从图1可以看出，在反应开始 文献[1】。本实验所用药剂均为分析纯。 12h内，3O。C和35。C条件下的降解速率明显要高 1．2 萘、菲的测定 于2O。C和25。C。其原因可能是在反应开始时，随 以高效液相色谱定量测定萘、菲浓度，色谱柱 着温度的升高，酶的活性较高 ，因此 ，反应随着 为C一18反相色谱柱，紫外检测波长254nm，流动 温度的升高开始 ；在30。C条件下，EPS与萘降解菌 相为 甲醇 ：水=90：10，流速为1．0mL／min。 耦合对萘的去除率最高为75％。 1．3 EPS的提取 (2)EPS与菲降解菌耦合降解菲。初始条件： 为了避免化学药剂对EPS性质的影响，采用物 EPS的投加量为42mg／L，菲的初始浓度为0．5mg／L， 理方法提取EPS。本文选用蒸汽法，将活性污泥试 pH值为7，菌悬液接种量为1％，转速为150r／min。 样置于