2012年高考第一轮复习 名师大讲堂 专题2微生物的培养与应用.pptVIP

专题2　微生物的培养与应用 重难点聚焦 考点1　培养基的种类及微生物的培养 1.培养基配制的程序及注意事项 （1）程序：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。 （2）注意事项: 　　①全程要求无菌操作。 　　②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶来估计培养基温度。 　　③平板需倒置：平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 　　④操作时使锥形瓶的瓶口通过火焰，通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 　　（3）培养基内所需的其他条件：①pH；②特殊营养物质，如：在培养基中添加维生素；③氧气的含量，如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。 　　2.培养基的种类 　　（1）按培养基的物理性质划分 名称 特征 功能 固体培养基 外观呈固体状态的培养基 主要用于微生物的分离、鉴定 液体培养基 呈液体状态的培养基 主要用于工业生产 　　（2）按培养基的功能划分 种类 制备方法 原理 举例 选择培 养基 培养基中加入某种化学物质 根据某种微生物的特殊营养需求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别培 养基 加入某种指示剂或化学药品 依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计 伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 　　①加入培养基的凝固剂（琼脂），一般不能被微生物利用，仅仅起到凝固作用。 　　②选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物，鉴别培养基可以鉴别特定的微生物，也可以存在其他微生物。 3.微生物的纯化培养（两种接种方法） （1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离。 　①原理：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 　②无菌操作：在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环。第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种。 　③注意事项：划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 （2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离。 　　①原理：细菌的数目随着稀释倍数增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 　　②无菌操作：所有操作都应在火焰附近进行，对涂布器等接种器具进行消毒和灭菌。 　　③统计实验结果：选取菌落数介于30～300个之间的平板进行计数。每一个稀释度下至少涂布三个平板作为重复组，不同稀释度下涂布的平板形成对照组。 　　①在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。 　　②不同细菌的菌落特征不同，菌落是鉴定菌种的重要依据。 　　例1　(2010·宁夏模拟)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 　　（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 和 。 　　（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。 　　（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定 在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。 　　（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越 。 　　（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培养基被称为 。 　　解析：蛋白胨含有维生素、糖和有机氮等营养物质，在培养基中主要是作为氮源，微生物的培养基各种配方一般都要含有水、碳源、氮源、无机盐。实验室的灭菌方法一般有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌（适合于培养基等物体的灭菌）。要想使微生物快速的繁殖，就要置于适宜的条件，特别是温度，所以要置于恒温培养箱中，对照实验就是要设置一个无菌的加以比较，进行观察。不同的细菌形成的菌落具有不同的形态，细菌菌落的特征是识别不同细菌的主要依据。菌落是由一个细菌细胞繁殖而来的，菌