同时检测美洲型及欧洲型PRRSV的多重RT-PCR检测方法的建立及应用.pdfVIP

在区内的7座城市之间，检测病料数量最多的为贵港、南宁、来宾三个城市，均有7 桂林采集的病料中三种腹泻病毒的检测结果均为阴性。 寒冷的春冬季节(11月到来年4月)多发，但是在温暖甚至是炎热的夏季部分养猪场仍然 受到PEDV和PRV的感染造成损失。因此，在没有很好的防控措施条件下，各养猪场对腹 泻病毒的防治仍不可放松。 ％’95．7％，同源性不是很高，表明本地流行毒株与欧洲疫苗株的关系不大，可为广西仔猪 腹泻病毒病原的防控提供一些参考。 4、参考文献 [13殷震，刘景华．动物疾病学：2版[M]．北京：科学出版社．1997． [2]王玲，蒲万霞，常惠芸，等．仔猪轮状病毒性腹泻的研究进展[J]．动物医学进 展，2006，27(10)：50-54 [3]田小艳，孙华， 邓雨修，等． 3种猪病毒性腹泻感染的多重PCR检测[J]．中国 畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集 (下册)，2009，89—92 同时检测美洲型及欧洲型PRRSV的 多重RT-PCR检测方法的建立及应用 施开创l水，莫胜兰1，张步娴l，屈素洁1，赵日浪2，钟诚2木 院，广西南宁530005) 摘要：为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速鉴别检测方法，本研究 基因433 bp／398bp片段、1对引物扩增美洲型经典毒株和变异毒株Nsp2基因338bp／248 bp片段、1对引物扩增欧洲型毒株ORF5基因614bp片段。经过反应条件的优化，建立了 能同时检测并区分美洲型经典毒株、高致病性变异毒株以及欧洲型毒株的多重RT-PCR检 测方法。该方法可以特异扩增3种病毒的基因，而与猪的其它重要病原均无交叉反应；3 收稿日期：2011—12- 基金项目：广西科学基金项目(桂科青0832057) 作者简介：施开创(1968一)．男，广西隆安人，副研究员，博士，主要从事动物疫病诊断与防控技术研究。 +通讯作者，E-mai1：shikaichuang@126．com ．216． X 种病毒重组质粒标准品的检出下限均为1．67 i03拷贝／uL。应用该方法检测176份临 别诊断和流行病学调查。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；美洲型毒株；欧洲型毒株；多重RT—PCR：检测方 法 and ofa RT-PCR for Establislment multiplexassay application detectionoftheNorthAmerican andthe PRRSV genotype Europeangenotype SHI i Kai—chuangH，MOSheng—lan‘，ZHANGBu—xianl，QUSu—je1，ZHAO Chen92+ CenterforAnimalDiseaseControland (1．Guangxi Prevention，Nanning ofAnimalScienceand 2．College Technology，GuangxiUniversity，Nanning530005， China) thiS RT—PCR wasestablishedfor Abstract：In assay study．amultiplOx simultaneousanddifferentialdetectionoftheclassicalstrainand