核黄素光化学灭活红细胞悬液巨细胞病毒的实验研究.pdfVIP

全的争论缺乏依据。只是从理论上推测，对未知病原体的感染风险SDPs比hWBDPs为低。如在我国，因 床使用SDPs比hWBDPs感染病毒的风险要低。 混合性手工分浓缩血小板制剂的缺点。与SDPs相比，手工分浓缩血小板制剂在制备过程中有三倍 高的细菌污染机率；有至少2倍高的细菌培养阳性率。在这两种血小板制剂中，绝大多数污染细菌为皮 肤污染的细菌。如果在混合性手工分浓缩血小板制剂发现细菌污染，则意味着从相应全血制备的红细胞 和血浆制剂都将报废。逻辑上推测，手工分浓缩血小板的制备和随后的混合更有利于在大的血液中心完 成。如同任何新产品一样，许多观点和争论将会随着时间的推移而逐渐清晰。 器设备，hWBDPs的价格可望进一步降低。因此，要评价哪种血小板制剂为好需考虑的问题更复杂。如 果hWBDPs具有与SDPs相类似的质量而又价格低廉，医生们会高兴看到这种可供选择的血小板制剂。 核黄素光化学灭活红细胞悬液巨细胞病毒的实验研究 ， 张循善1杨鹏1王明丽2胡勇2 1安徽医科大学第一附属医院输血科，合肥230022 2安徽医科大学微生物学教研室，合肥230032 目前由于病原体检测方法的局限性，临床输血尚不能完全排除传染疾病的可能，仍然存在感染乙肝 病毒、丙肝病毒、巨细胞病毒甚至HIV等的危险。研究表明，降低这种风险的有效措施是灭活血液及制 品中可能存在的病毒i病毒灭活有多种技术，光化学法是一种简单宜行，效果可靠的方法。目前采用光化 学灭活血浆和血小板的病毒进行了许多广泛深入的研究¨。1，但红细胞悬液的病毒灭活一直是输血医学 界普遍关注而未解决的问题。笔者采用核黄素联合可见光的光化学法，对红细胞悬液中的指示病毒进行 灭活处理，以探讨红细胞悬液中的病毒灭活的可行性。 1材料与方法 beeoo’8Modified Sag,le 酸性水溶液)。红细胞悬液由合肥市中心血站提供。 1．2实验病毒和宿主细胞人巨细胞病毒(human ADl69株)、人胚成纤维细 cytomegalovirus．HCMV 胞(human 稀释在已长成单层的HF中复苏，经过传代后，接种于均匀单层HF中，加入维持液后37℃5％C02条件下 继续培养，待细胞病变(cytopathic 液，一20℃在反复冻融，分装入无菌试管中，置一80℃保存。HF原代细胞由0．25％的胰蛋白酶消化后传 ·lO· 代麓第5—6代后作为实验宿主细胞。 1．3灭活样品的翩备将红细胞悬渡调整压积为40％，按9：l的比铡加入HCMV病毒液，辫分别加 1．4核黄素与可见光单独作用对红细胞悬液HCMV的处理将不含核黄索的上述样品加入16孔细 孔0。6ml。22℃条件下邋光放墨O、lO、∞、30、40min，再转剐取样检测残留病毒漓度。 l∞W卤素灯照射0、10、20、30、40rain，再取样检测残留病毒漓度。 lO”至×10～，取稀释好耱样本100ul／孔加入土述96藐缀随培养板上，每稀释度加入平行做4魏，同时设 细胞、病毒对照，37℃5％C02条件下培养。逐日观察CPg至第7日，对未见病变细胞盲传3代后，按 Infection Culture Reed—Muench公式”1计算组织堵葬半数感染量法(TissueDose，TCID∞)，评价瘸毒灭活 效果。重复试验3次。 1．7 micro- eluteDNA提取试剂盒提墩出的DNA用于PcR扩增。根据GenbankHCMV—ADl69株全基因组资料，选 ACG