重组腺病毒介导的ING-4用于人MCF-7乳腺癌细胞的体外基因治疗.pdfVIP

· 40 · 2015年2月第 7 onco．February．2015．Vo1．7，No．1 论 著 重组腺病毒介导的ING-4用于人 MCF一7 乳腺癌细胞 的体外基 因治疗 吴 乙夫， 董晓强 作者单位 ：215006 江苏 苏州，苏州大学附属第一医院 普外科 第一作者：吴乙夫，男，硕士研究生，研究方 向：乳腺疾病 的基础研究，E—mail：821381555@qq．com 摘【要】 目的 研究重组腺病毒介导的ING-4感染人MCF-7乳腺癌细胞后对其的生长抑制作用。 方法 将搭载有 ING4基因的重组腺病毒载体Ad—ING-4感染人MCF-7乳腺癌细胞 ，用荧光显微镜、RT- PCR和Western—Blot法检测 ING-4在MCF-7细胞中的转录和表达；CCK法与流式细胞技术检测 ING-4基 因对 MCF-7细胞的生长抑制和促凋亡作用；半定量 RT—PCR法检测 ING-4基因表达对 MCF-7细胞中相 关凋亡基因表达的影响。结果 在MCF-7细胞中ING-4基因的表达对其细胞增殖有明显抑制作用，并 显著促进其凋亡，ING-4表达使 MCF-7细胞中Bax表达上调 ，Bcl一2、Survivin表达下调。结论 MCF-7细 胞在转染 ING-4基因后其增殖受到了明显抑制 ，且更易凋亡，可能是通过改变Bax，Bcl一2及 Survivin表达 水平来实现。 【关键词】 ING-4基因；腺病毒载体；MCF-7人乳腺癌细胞；凋亡 doi：10．3969／j．issn．1674—4136．2015．01．011 文章编号：1674—4136(2014)05—0040—04 Enhanced chemotherapysensitizationeffectofrecombinantING-4adenoviruson MCF-7 breastcancer cells Yf／u，DONGXiaoqiang．(DepartmentofGeneralSurgery，TheFirstAffiliatedofSoochowUniversi— ty，Suzhou215006，China) Correspondingauthor：WU y ，E—mail：821381555@ qq．com Abstract：Objective Toexplorethegrowth—inhibitoryeffectsontheMCF-7humanbreastcancercellsof theadenovirus—mediatedING-4gene．Methods TheMCF-7humanbreastcancercellswereinfectedwithAd— ING-4．Fluorescencemicroscope，RT—PCRandW estern—Blotanalysiswereselectedtodetectthetranscriptionof ING-4gene．CellrgowthinhibitionandapoptosisweredetectedbyCCK一8assayandflow cytometry．Inaddi— tion．RT—PCRwasselectedtodetecttheexpressionofBaxandBcl一2．Results Thecel1．growthofMCF-7cells infectedbyAd—ING-4wereobviouslyinhibited，andtheinfectedcellshadahigherapoptosisrate．Expressionof ING-4 had relationships with the up—regulation of Bax and down—reuglation of Bcl一2 and Survivin． Conclusions AdlNG4caninhibitthergowth ofMCF一7cellsandinducecellapoptosis，whichmayresultin changingBaxandBcl一2 expression． Keywords： ING-4gene； adenovirusvector； MCF-7humanbre