正交设计法优选侧柏叶炮制工艺.pdfVIP

中华中医药学会四大怀药与地道药。于研究论坛暨中药炮制分会第二届第五次学术会议与第三届会员代．表大会论文集 正交设计法优选侧柏叶炮制工艺 曾祥丽，丁安伟，单呜秋 (南京中医药大学药学院，江苏南京210046) 摘要 目的：正交优选出侧柏叶最佳炒炭工艺。方法：采用正交试验法，以槲皮素为指标 性成分，对炒炭的温度和时间两个影响因素进行研究。结果：通过正交实验，确定侧柏炭炮制 的最佳工艺为炒制温度控制在280℃，炒制时间为5min。结论：此工艺稳定可行，重现性好。 关键词炮制工艺；正交设计；侧柏炭：槲皮索；HPLC 侧柏叶为柏科植物侧柏(尸肠们地d酗D，记删括(L．)Franco)的干燥枝梢及叶…，其性味苦涩，性寒， 具有凉血止血的功效，常用于吐血、尿血、便血、崩漏等各种出血症，为中医常用的止血药。侧柏 叶的主要成分为鞣质、黄酮及挥发油等【2j。2005版中国药典一部侧柏叶含量测定项下用肿LC法测 定侧柏叶中槲皮苷的含量，控制侧柏叶的质量，但是侧柏炭尚未有指标成分和测定方法。据文献报 道，槲皮素是其主要止血有效成分吲。本实验采用反相高效液相色谱法，以黄酮类成分槲皮素为指 标，建立了侧柏炭的含量测定方法，并以此方法优选出最佳炮制工艺。 1仪器、试药和样品 1．1仪器 清洗器、AIll(e 1．2试药 槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：l0081．9905)、三氟乙酸(分析纯)、甲醇(色 谱纯)、重蒸水、盐酸(优质纯GR) 1．3样品 药材侧柏叶购自南京市药材公司，并经我校中药鉴定教研室吴启南教授鉴定为柏科植物侧柏 @la啦|ndusoriem越is(L．)Frn眦。哟干燥技梢及|叶o 2侧柏炭中槲皮素的含量测定 2．1色谱条件 色谱拄：Hanbon lmL·min～：检测波长：254nm；柱温：30℃。 2．2对照品溶液的制备 分别称取以五氧化二磷干燥24h的槲皮素对照品2．54mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释 至刻度，摇匀。再吸取O．5mL于5mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，作为对照品溶液，供标准曲线 用。 2．3供试品溶液的制备 取侧柏炭粗粉19，精密称定，置于索氏提取器中，加足量的石油醚同流至无色，弃去石油醚， 药渣连同滤纸筒挥干溶剂后，置于圆底烧瓶中，加入50mL70％乙醇，水浴回流2h，将上述提取液 滤过，置于50mL容量瓶中，用70％乙醇稀释至刻度，得供试品溶液。 2．4线形关系考察 按‘‘2．1”项下色谱条件，对照品溶液分别进样5、lO、15、20、25L，测定槲皮素峰面积，以进 ·171- 炮制工艺 (r=0．9999)。结果表明，槲皮素在0．508～2．54g·mL。范围内呈良好线形关系。 2．5精密度试验 在上述色谱条件下，槲皮素对照品溶液进样lOL，连续测定6次，槲皮素RSD为0．68％，结 果表明精密度良好。 2．6稳定性试验 L， 按照‘‘2．3，，项下方法制得供试品溶液l份，在上述色谱条件下于O、4、8、12、24h分别进样10 测得槲皮素的峰面积，计算RSD值，结果表明槲皮素在24h内稳定性良好，RSD为0．89％。 2．7重复性试验 按照‘‘2．3”项下方法制得供试品溶液6份，在上述色谱条件下进行测定，根据峰面积计算含量，结 果槲皮素的RSD为1．24％。 2．8加样回收率试验 精密称取已知含量的侧柏炭各9份，分别加入一定量的槲皮素对照品溶液(槲皮素浓度为 O．1016mg·mL-1)，按·‘2．3”项制成供试品溶液，并按含量测定方法进行测定，结果槲皮素加样回收率 为97．05％，RSD为O．73％。实验结果表明该测定方法测定结果准确。 3正交设计法优选侧柏叶炒炭工艺