超高效液相色谱-大体积流通池荧光法检测奶及奶制品中的黄曲霉毒素M1.pdfVIP

浙江文学学报(农业与生命科学版) 39(2)：191～196，2013 JournalofZhejiangUniversity(Agric． LifeSci．) http：／／www．journals．zju．edu．cn／agr E-mail：zdxbnsb@zju．edu．ca DOI：10．3785／j．issn．1008—9209．2012．11．612 超高效液相色谱一大体积流通池荧光法检测奶及 奶制品中的黄 曲霉毒素M， 王军淋 ，蔡增轩 ，任一平 (1．浙江工业大学化学工程与材料学院，杭州 310014；2．浙江省疾病预防控制 中心 ，杭州 310054) 摘要 采用超高效液相 色谱 系统，并配有大体积流通池的荧光检测器快速检测奶及奶制品中的黄 曲霉毒素 M ． 在样 品中按 77l(牛奶)：V(乙腈)一1：2．5的比例加入 乙腈，采用涡旋及超声辅助液液萃取法对样 品中的黄 曲霉 毒素M。进行提取，经离心后，取上清液用磷酸盐缓冲液稀释，过黄 曲霉毒素M 免疫亲和柱进行净化及浓缩；采 用V(甲醇)：V(乙腈)一50：50及纯 水作 为流动相 ，经 UPLCBEH C18柱 (100mmX2．1mm，1．7 “m)分 离．结 果表明：该方法的定量限为 0．03Mg／kg，低于现行食品安全国家标准对食品中黄 曲霉毒素 M 的最低限量标准， 符合检测要求；同时，在 0．O6～1．2 “g／kg范围内具有 良好 的线性，其线性相关系数大于0．999；3个加标浓度 的 回收率在 81．95 ～94．20 之间，效果较好 ；采用大体积流通池检测的灵敏度较普通流通池提高了近 3倍 ；经用 于奶及其制 品中黄 曲霉毒素 M 的检测结果与现行标准方法一致 ；另外，在前处理 中，用 乙腈对样 品中的黄 曲霉 毒素M 进行提取，可以有效地沉淀样品中的蛋 白质，从而得到澄清的提取液，在过免疫亲和柱净化时只需利用 溶液 自身重力作用即能过柱．综上，此定量方法具有样品前处理简单、检测速度快和灵敏度高等优点，适用于对牛 奶 中黄 曲霉毒素M 的检测 ． 关键词 黄 曲霉毒素 M1；超高效液相色谱仪 ；大体积流通池 ；荧光检测 ；沉淀蛋 白 中图分类号 TS252．5；O658 文献标志码 A Determination of aflatoxin M l in m ilk by ultra-performance liquid chromatography and fluorimetricdetectioncombinedwithlargevolumeflow cel1．JournalofZh@angUniversity(Agric． LifeSci．)，2013，39(2)：191—196 WANGJunlin ，CAIZengxuan。，RENYipingr (1．CollegeofChemicalEngineeringandMaterialsScience， ZhejiangUniversityofTechnology，Hangzhou310014，China 2．ZhejiangProvincialCenterforDisease PreventionandControl，Hangzhou310054，China) Summary Aflatoxins(AFT)，whosebasicstructureiscomposedofdifuranandcoumarin，have17kindsof derivativesincludingB1，B2，G1，G2，M l，M2，etc．AFT M 1wasfirstlyseparatedfrom milk．AFT M 1andAFT M2werethederivativesofAFT B1andAFT Bzthroughtheanimalmetabolism ．Especially，AFT BlandAFT M 1 havebeendefinedasacategoryA and2B carcinogenbytheInter