微米、亚微米级二氧化硅颗粒的制备及在加压毛细管电色谱应用.pdfVIP

。全国生物医药色谱学术交流会(2010)论文集 B28微米、亚微米级二氧化硅颗粒的制备及 在加压毛细管电色谱中的应用 ‘张晓辉王彦谷雪．．阎超幸 上海交通大学药学院，上海200240 关键词：二氧化硅颗粒，C18键合硅胶固定相，加压毛细管电色谱 近年来，微米、亚微米色谱填料由于其高柱效、高分辨率而备受关注，液相色谱固定相 所用颗粒粒径从早期的5pm逐渐降低至1．5lam，柱效相应增加到了20万理论塔板数／米的高 柱效，然而由于此类色谱柱反压过高限制了其在传统液相色谱中的应用。加压毛细管电色谱 (pCEC)由于采用压力和电渗流联合驱动流动相，因此可以在使用微米、亚微米颗粒固定相 时仅使用很低的辅助压力(500．1000 psi)即可实现较高的分离柱效llj。 本文采用改进的的StOber法制备了微米及亚微米级无孔裸硅胶颗粒，并键合C18将其作 为色谱固定相，同时考察了三种基本化合物在该裸硅胶柱上的毛细管色谱分离性能。 1实验部分 1．1仪器与试剂 GV CEC系统(美国通微分析技术有限公司)，包括流动 加压毛细管电色谱TriSeprM-2100 相输送系统、正负30kV的高压电源、紫外．可见可变波长检测器和数据处理系统。 ， 乙腈(色谱纯)：娃哈哈饮用纯净水。硫脲、苯乙烯、萘、三羟甲基氨基甲烷(％s)均 i．d．×360 为分析纯。石英毛细管(100皿l Ixmo．d．，河北永年锐沣色谱器件有限公司)。 1．2实验方法 1．2．2微米、亚微米二氧化硅颗粒的合成 h，陈化12 在圆底烧瓶中依次加入乙醇、氨水、水、四乙氧基硅烷，搅拌反应16 h，抽 mol／L 滤水洗至中性。80℃真空干燥4h，600℃煅烧5h。用O．1 HCL浸泡过夜，抽滤至中性， 150℃真空干燥4h。实验中将制备的硅胶进行键合，首先氮气保护下将硅胶颗粒置于含有十八 烷基二甲基氯硅烷的无水甲苯溶液反应24至36小时，然后依次用无水甲苯、甲苯、丙酮、 甲醇洗涤，置脂肪提取器中，丙酮抽提48h，制得C18键合的硅胶固定相。 1．2．2加压毛细管电色谱分析条件 将色谱柱用流动相反复冲洗后，再用流动相平衡lh，待基线稳定后进样测定。色谱柱为 16cmxl00 lainid，l岬自制ODS硅胶柱。流动相为乙腈／1mmol／LTris．HCl缓冲液，泵流速 0．18 ml／min，进样量为1nl，进样分流比为1000：1。 2结果与讨论 本研究在StOber方法基础上考察了各反应条件对生成二氧化硅(Si02)颗粒直径大小及 ‘通讯联系人： 基金项目：国家科技部农业科技成果转化资金项目(2008002)，上海市科委科学仪器环境条件建设项目 (09142200202)和国家自然科学基金项目。 60 全国生情医药色膏挚术交流会12010)论文亲 粒径分布的影响，采用扫描电镜(SEM)表征，确定了制备粒径范围在600衄～1000nm单 分散二氧化硅徽球的实验条件。同时确定了在硅胶颗粒表面进行C18磬饰的反应条件。 圈1 850am、1000 aznCl8恬怖硅腔颢牲扫描电镜圈 本研究还对卜IIⅡlCl8键台反相硅腔填充毛细管色谱柱进行了研究。采用高压匀浆祛将自 制的I岬C18键台反相硅胶填充A总长为45 cm(有效长度为15锄)，内径为100岫的毛细 管中，在p-cEc模式下取得了较好的柱效，达到120000理论塔板数，米。