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家禽传染病
引物相同的竞争能力,并能退火延伸,从而保证了引物退火的特异性。而在延伸阶段,温度升高至负引物
从模板解离下来,不影响延伸的进行。
与鸡新城瘦常规检测方法相比,荧光定量PCR灵敏度高,重复性好,能够对样品中的基因拷贝数准确
定量;PCR扩增和产物分析在单管封闭的条件下进行,利用微机自带软件,实现了对扩增产物进行实时动
态检测和结果的自动分析,克服了常规PCR不能准确定量、容易交叉污染、产生假阳性等缺点。同时,由
于荧光PCR仪具有30~98个孔,可以同时检测大量样本,节省了人力、物力。
由于本试验直接把荧光索标记在引物上,与传统的Taqman探针技术相比,标记成本低、设计简单;
荧光引物在PCR扩增时荧光强度与扩增的产物量相关,荧光量的增加与PCR产物的积累量呈比例关系【121,
有效解决了SYBROreenI特异性低的问题。
总之,使用荧光烈引物进行鸡新城疫的检测,具有特异性强、灵敏度高、重复性好、能够准确定量等
优点,在鸡新城疫临床诊断、出入境检验检疫中有着广阔的应用前景。因此。把实时荧光PCR方法应用到
NDV检测和鉴定具有深远的意义。
参考文献略
鹅源副粘病毒研究进展
左玉柱丁壮‘
(吉林大学畜牧兽医学院动物重要病原与疫病研究室)
摘要:鹅副粘病毒病是在我国首次发现的一种鹅的烈性传染病。本病最早于l997年2月被扬州大学
千永坤…和华南农业大学辛朝安唰在国内首次发现。1997年以来,该病在全国许多省市的鹅群中流行,给
鹅场造成了极大的危害,已成为我国养鹅业危害最大的传染病。鹅副粘病毒病是由禽副粘病毒I型引起的
以鹅消化道病变为主要特征的一种急性病毒性传染病,发病率和死亡率可高达98%。其病变特征为:脾脏
和胰腺肿大。有灰白色坏死灶;肠道出血溃疡.并附有大量纤维素性结痂,不易剥离例。为了研究鹅副粘
病毒病的致病机理、免疫机理以及特异性的诊断和预防.国内多家科研院所从病原的分离与鉴定”J、流行
病学9】、病理变化pJ的研究、基因的克隆与序列分析171等方面做了大量的工作。取得了较大的进展。
关键词:鹅源副粘病毒分子生物学研究进展
1鹅源副粘病毒的一般特征及基因结构
有囊膜,完整的病毒粒子近圆形,有时因囊膜破损而形态不规J110。囊膜上的纤突长约8毫微米。在囊膜外
呈放射性排列,具有能刺激宿主产生抑制红细胞凝集素和病毒中和抗体的抗原成份p。1…。病毒的核酸类型
NDVt7,11,121。
约为5×106kDa,含有一组串联的基因,其排列顺序为3’-NP.P.M.F.I-IN.L.5u”】,NP为核衣壳结构蛋白
第六孜全国会员代表大会暨第11次学术研讨台 .
基因.其长度为1.4kb;P为磷蛋白的基因,长度为I.2kb:M为基质蛋白(又称膜蛋白)基因,长度为
kb之间II~….
分子量为220x103的RNA聚合酶)基因,长度在6.6-6.7
2鹅源副粘病毒结构蛋白与功能
鹅源副粘病毒编码6种结构蛋白II“,其中3种蛋白与囊膜有关即固定在病毒囊膜表面上的血凝素—神
Protein;l-IN)、融合糖蛋白(FusionProtein;F)以及膜蛋
经氨酸酶蛋白‘(Haemagglutinin-Neuraminidase
白(Matrix Protein:
NP)、磷蛋白(Phoshate Protein;L)。
Protein;P)及大蛋白(Large
2.1F蛋白的结构与功能
F蛋白是禽副粘病毒感染细胞所必须的””。该蛋自在病毒的吸附与穿膜过程中起着重要作用,F蛋白
可以促使病毒囊膜与靶细胞膜融合,使病毒得以穿入细胞浆脱去核衣壳进行复制Il…。F蛋白的基因约1.7kb,
形式存在,病毒感染细胞后,在蛋自修饰酶的作用下,裂解产生由二硫键连接的Fl和F2.是病毒具有感
白的裂解能力,是构成病毒毒力的分子基础。另外,F蛋白具有较高的保守性,有很好的抗原性。
F蛋
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