海洛因依赖者在第9、10与11号染色体上的易感基因位点的分析.pdfVIP

娜七次全国蕊珍类药研究学术交渡会 The70NadonafSymposiumonResearchofHenbane 海洛因依赖者在第9,10和11号染色体上的易感基因位点的分析 谢小虎 周文华 韩玲玲 张建兵杨国栋 宁波市微循环与蓖若类药研究所，宁波戒毒研究中心，宁波(315010) 摘要:目的:筛查海洛因依赖者在第9,10和11号染色体上的易感基因的位 点。方法:对 10例海洛因依赖者和其正常同胞对照者的第9,10和 11号染色 体进行以短串联重复序列 (shorttandemrepeats,STR)为遗传标记的基因扫描 分析。结果:D9S286,D9S167,D9S164和D10S208,D10S196,D10S185, DlOS1693位点的等位基因在海洛因依赖组和其正常同胞对照组之间分布有显著 性差异 (x2检验，P0.05)，其它STR位点的等位基因在海洛因依赖组和其正 常同胞对照组之间分布没有显著性差异 (x2检验，P0.05)。结论:9号染色体 上 D9S286,D9S167,D9S164位点和 10号染色体上 D10S208,DIOS196, D10S185,DIOS1693位点附近可能存在海洛因依赖的易感基因。 关键词:海洛因;染色体;短串联重复序列 近年研究表明药物依赖与多基因作用有关，是一种受社会环境因素和个体 遗传因素综合作用的行为疾病川。动物实验证实药物依赖的形成受遗传因素的 影响，如Lewis大鼠较Fischer大鼠更容易造成对酒精和可卡团口服液自身给药 的行为模型，对吗啡容易成瘾的和抗吗啡成瘾的大鼠也被选育繁殖出来121。已 有研究表明11和8阿片受体基因的单核昔酸多态性 (singlenucleotide polymorphism,SNP)，前脑啡肤基因，D2.D3,D;和D。多巴胺受体基因多态 性与海洛因依赖易感有关131。微卫星 (microsatellite)亦称短串联重复序列 (STR)，是以2-6个碱基为核心单位的串联重复序列，广泛分布于人类基因 组，多存在于非翻译区和内含子中，由于核心序列重复次数不同造成每个位点 的高度多态性并呈孟德尔共显性遗传。利用微卫星两端的保守序列设计特异性 引物，用PCR技术扩增ST凡经电泳分离后可显示不同个体在此位点的多态 性。STR在人类遗传图构建和基因定位中己被广泛应用，以微卫星为遗传标记 进行大规模的基因组扫描技术已成为当今疾病基因定位的重要工具。目前在9, 10和11号染色体上已定位千余个基因，有多个基因与神经系统的功能有关。本 文应用基因组扫描技术来分析9,10和 11号染色体上的海洛因依赖易感基因的 位点。 1材料与方法 1.1样本来源 宁波戒毒研究中心收治的10例海洛因依赖者，均符合DSM- W阿片依赖的诊断标准，吸食海洛因时间均在1年以上，年龄 22-37岁，其中 The70NationalSymposiumonResearchofHenbane 第七次全国贫若类药研究学术交流会 男性8例，为海洛因依赖组。他们正常的同胞共 10例，年龄24-41岁，无阿片 类药物滥用史，尿吗啡检测阴性，作为同胞对照组。 1.2DNA提取按常规酚:氯仿法提取外周血细胞基因组DNA,紫外分光光 度法定量，稀释至50ng1川备用。 1.3STR位点选择 选取第9号染色体上20个STR位点，第 10号染色体上 20个STR位点，第 11号染色体上17个STR位点，覆盖整条染色体，相邻两位 点平均间距为 1OCM，最大间距 13.9cM，最小间距2.4cM。这57个STR位点 是 :D9S288，D9S286，D9S285，D9S157，D9S171，D9S161，D9S1817， D9S273，D9S175，D9S167，D9S283，D9S287，D9S1690，D9S1677， D9S1776，D9S1682，D9S290，D9S164，D9S1826，D9S158，DIOS249， DIOS591，D10S189,D10S547,DIOS1653,D10S548,D10S197,DIOS208, D10S196,D10S1652,D10S537,D10S1686,DIOS185,D10S192,D10597, DIOS1693， DIOS587， DIOS217， DIOS1651， DIOS212， DIIS4046， D11S1328,D11S902,D1