实验二温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响--预习.docVIP

实验二 温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 温度、p H对酶活性的影响 一、实验目的 了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适pH及掌握一种检测最适pH的方法。 二、实验原理（请同学们自已补充） 三、实验步骤 1、温度对酶活性的影响 取3支试管，编号后按下表加入试剂 试剂 试管编号 1 2 3 0.2%淀粉溶液（d） 1.5 1.5 1.5 稀释唾液/ml 1 1 无 煮沸过的稀释唾液/ml 无 无 1 摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。 注意事项： 唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min后，使其流入量筒，并稀释到50ml。 2、pH对酶活性的影响 取4个标有号码的20ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备pH=5.0~8.0的4种缓冲液。 试剂 试管编号 1 2 3 4 0.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.72 0.1mol/L柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28 pH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。 第4管加入唾液2min后，每隔1min由第2管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第1管起，均为1min。 观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。 注意事项： 1）从第三管中取混合液，是因为它的pH接近唾液淀粉酶的最适pH。 2）间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各试管反应时间相同。 四、实验结果 1、温度 管号1 2 3 2、pH 1 2 3 4 原因分析： 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 一、实验目的 了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 二、实验原理 三、实验步骤 取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。 试剂 试管编号 1 2 3 4 0.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.5 1%CuSO4溶液/ml 0.5 无 无 无 1%NaCl溶液/ml 无 0.5 无 无 1%Na2SO4溶液/ml 无 无 0.5 无 蒸馏水/ml 无 无 无 0.5 稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 37摄氏度恒温水浴5min 碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2 四、实验结果 1 2 3 4 原因分析：