羊卵母细胞冷冻保存的研究进展.pdfVIP

第 36卷 第 1期 家畜生态学报 Vo1．36No。1 2015年 1月 ActaEcologiaeAnimalisDomastici Jan．2015 。 。。 ‘。 ‘。 。 5学科动态 2 ( ) ．() ．() ． 羊卵母细胞冷冻保存研究进展 马 媛 ，权 国波 ，洪琼花 (1．云南省畜牧兽医科学院，云南 昆明 650224；2．云南农业大学 动物科学技术学院，云南 昆明650201) [摘 要] 近年来，绵羊、山羊胚胎工程技术的快速发展致使对卵母细胞的需求量越来越大。 此外，作为家畜种质资源保护体 系的组成部分，卵母细胞也是保存优秀雌性家畜遗传资源的重 要方式之一。然而，作为胚胎生物技术的重要环节 ，由于其 自身特殊的结构功能特点，卵母细 胞对低温和冷冻极其敏 感，其冷冻保存研 究水平远低 于胚胎 。因此，如何提高冷冻保存 卵母细 胞质量是低温生物学和胚胎生物技术研究领域的热点和难点。针对 目前绵羊、山羊卵母细胞 冷冻保存 的最新研 究进展和存在问题进行综述 ，同时针对如何进一步提 高绵羊、山羊卵母细胞 冷冻保存质量提 出建议 ，以期为之后的研究工作提供理论指导。 [关键词] 绵羊；山羊；卵母细胞 ；冷冻保存 [中图分类号] $811．6 [文献标识码] A [文章编号] 1005—5228(2015)01—0001—05 卵母细胞的冷冻保存可以实现优 良母畜种质资 此外，与胚胎相 比，卵母细胞的体积与表面积比 源的长期保护 ，同时也为体细胞核移植 、转基因动物 值较大[】]，胞质相对丰富，对冷冻保护剂渗透性差 ，冷 制作 以及胚胎体外生产等胚胎工程技术提供充足的 冻时不易充分脱水 ；在胚胎冷冻过程中，一些细胞损 材料来源。卵母细胞冷冻保存对于胚胎工程的最大 伤死亡后 ，剩余的细胞仍有可能修复进行正常的胚胎 意义在于这种技术可以使胚胎工程技术研究不受时 发育，但因卵母细胞为单一细胞 ，无法进行冷冻后修 间、地域 限制，随时随地进行 。虽然卵母细胞的冷冻 复，损伤后难以存活 ；另一方面，颗粒细胞和卵母细胞 保存技术是基于胚胎冷冻保存技术发展而来 的，但 通过间隙连接相联系，这种联系是卵母细胞成熟发育 是 由于卵母细胞较胚胎具有独特 的功能和结构特 的必要条件，有颗粒细胞和无颗粒细胞的绵羊卵母细 点 ，在冷冻和解冻过程中更易遭受各种冷冻损伤 ，使 胞培养27h后达到 MII期的比率有显著差异_2；另外 卵母细胞冷冻保存技术远远落后于胚胎冷冻保存技 卵母细胞难 以冷冻成功，可能与其特殊的内含物有 术的水平。我国绵羊、山羊品种资源丰富 ，然而相对 关 ，例如猪卵母细胞 内含有大量脂滴，牛卵母细胞 中 于牛、猪等畜种而言，绵羊、山羊卵母细胞冷冻保存 含有大量囊泡 ，这些结构对冷冻很敏感。 技术的研究水平相对较低 。因此有必要加强其卵母 卵母细胞的低温敏感性还与其成熟阶段密切相 细胞冷冻保存技术 以及相应 的损伤机制的研究。 关 ，冷冻不同时期卵母细胞仍存在许多问题 ，不同成 熟阶段 的卵母细胞冷冻效果及冷冻后的存活率也不 1 卵母细胞冷冻损伤机制研究现状 尽相 同。目前大多数研究主要集 中于 M Ⅱ期 成熟 玻璃化对冷冻卵母细胞所带来的损伤是多方面 卵母细胞 ，认为处于 M Ⅱ期阶段的卵母细胞不管是 的，如减数分裂纺锤体和染色体破坏、DNA 损伤、 体外成熟还是体 内成熟都