新一代微量凝胶色谱mGPC的发展.pdfVIP

高 分 子 通 报 2008年 11月 新一代微量凝胶色谱 mGPC的发展 于志勇 (北京龙智达公司) 自从2O世纪 60年代中期到现在 ，凝胶渗透色谱仪在仪器方面一直沿用以普通高效液相色谱仪的模 式。在大分子分离和测试方面虽然 已经有很成熟 的技术和经验，但从分子量和分子量分布的测试上来 说，还是有很多不足的地方 。 90年代初 ，由于色谱柱填料合成的改进和仪器加工工艺的提高，已经研制出凝胶色谱专用的仪器 — — 微量凝胶色谱 micro—GPC。 微量凝胶色谱 (mGPC)是集高效、环保、节约于一体的最新凝胶色谱技术。mGPC具有比普通 GPC更 高的柱效、更快的分离时间和使用更少的试剂等优势，是今后凝胶色谱的一个发展方 向。 与传统的凝胶色谱区别 表 1 微量凝胶色谱与传统凝胶色谱的主要仪器指标 比较 从上表数据可以看出，在mGPC中，仪器硬件的主要 指标都已经微量化。微量化后，系统 的死体积大大地减 小 ，扩散减到最低，低浓度样品的检出灵敏度显著提高。 凝胶柱填料的粒径由原来的5 和 l0 变成现在的3 ，使 色谱柱的柱效和分辨率得到很大的提高。常规 GPC的柱 效 TPN45，000／m，而 mGPC的TPN100，000／m，也就是 说用现在的微量柱一支就可 以做到原来 3支凝胶柱分离 效果 。 微量化后仪器 的试剂消耗 在相同的时间段内，mGPC所消耗的溶剂是普通 GPC 的六分之一 ，而样品数可以增加一倍。 图1mGPC和普通GPC的色谱图比较 SuperHZ是 mGPC的色谱 图；Hhr是普通 GPC的色谱图。 第 11期 高 分 子 通 报 大分子的mGPC仪器测试 从图 1我们可以看出，同一样品在mGPC系统 中，样品的保留时间只是普通 GPC的三分之一。 分子量测定结果的比较 表 2 微量凝胶色谱与传统凝胶色谱对样 品SRM706的分子量分布的测定 较 mGPC对不同样 品的测试特性 (1)低分子量添加剂的分析 Elution voIiAnlo(椰I) 色谱柱 ：(A)GPCKF--402HQX2；流动相：THF；流量：(A)O．3ml／min；检测器 ：mR1；温度：25℃；样品：1．PSMW66，000；2．PSMW 3，250；3．Propylbenzene；4．Benzene 图2 低分子量添加剂的分析色谱 图 (2)脂肪酸的分析 liir~t,es 流动相 ：THF；流量：O．3ml／min；检测器 ：mRI；温度 ：40~C；样 品：C…H2 ICOOH，10micro．L 1．蜂花酸 (n=29)0．1％；2．蜡酸 (n：25)0．1％；3．山嵛酸 ( ：21)O．1％；4．花生酸 (=19)o．1％；5硬脂酸 ( =17)0． 1％ ； 6．棕榈酸(n=15)o．1％；7．肉豆蔻酸(n=13)o．1％；8．月桂酸 (n=11)；9．羊蜡酸 (n：9)0．1％；10．羊脂酸(n：7)0．1％； 11．正 己酸 (n=5)0．1；12．颉草酸 (11=4)0．3％ 图3 脂肪酸的分析色谱图 综上所述 ，与普通 GPC相比，mGPC具有节约溶剂、省时问、分离效果更好 以及几乎可以忽略不计的 死体积，使峰加宽效应降到最低等优点。同时，由于mGPC的进样量是普通 GPC的五分之～，可以减少样 品的消耗，有利于分析低浓度或小分子的样品。因此，mGPC是凝胶色谱今后的发展方向。