肝细胞癌中p21活化蛋白激酶6的表达及意义.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2014Mar；30(3) ·313 · 网络 出版时间：2014—3—2513：06 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．13315／j．cnki．cjcep．2014．03．022．html 肝细胞癌中p21活化蛋 白激酶6的表达及意义 陈宏伟，王春华，李军良，朱 勇，王建新，吴 侠 摘要：目的 探讨 p21活化蛋白激酶 (p21一activatedprotein 尚未见相关报道。本文通过 Westernblot技术和免疫组化 kinase，PAK)6在肝细胞癌 (hepatoeellularcarcinoma，HCC) sP法观察 HCC患者中PAK6蛋白表达，探讨其与HCC患者 组织中的表达及其意义。方法 采用 Westernblot技术检测 临床病理参数及预后的关系。 8例HCC及对应癌旁正常组织中PAK6的表达，运用免疫组 1 材料与方法 化 sP法检测 121例 HCC组织及癌旁组织中PAK6的表达。 结果 Westernblot及免疫组化分析显示 ，PAK6在 HCC组 1．1 标本资料 收集秦皇岛市第一医院2003年 4月 一 织中的表达明显高于对应癌旁组织。HCC中PAK6表达与 2009年5月经术后病理证实为HCC的石蜡标本 121例。其 HCC的Edmondson—steiner组织学分级和肿瘤结节数之间差 中，男性 96例，女性 25例，年龄 30～75岁，中位年龄 45．0 异有统计学意义，PAK6表达与增殖指标 Ki-67呈正相关 (P 岁；Edmondson—steiner组织学分级：I级 35例，Ⅱ级 53例 ，Ⅲ 0．01)。Kaplan—Meier生存曲线分析表明，高表达PAK6的 +Ⅳ级33例 ；15例有转移(包括淋巴结转移、门静脉癌栓和 HCC患者总生存率和无病生存率均显著 降低 (P均 远处转移)，106例无转移 ；肝癌直径≤5em者90例 ，肝癌直 0．001)。单因素生存分析表明，PAK6的高表达与HCC患者 径5em者31例；肿瘤单发67例，多发54例；HBsAg阳性 预后不 良有关 (P0．001)。COX危险比例模型多因素分析 92例；合并肝硬化5l例。121例患者中103例获得随访，随 显示，PAK6和 Ki-67、肿瘤 Edmondson-steiner分级、转移、肿 访时间21～71个月，中位随访时间36个月。8例新鲜 HCC 瘤大小、肿瘤数 目可作为 HCC患者预后的独立指标。结论 组织由秦皇岛市第一医院提供 ，新鲜 HCC离体后 30min内 PAK6在HCC组织中明显高表达，可作为HCC患者独立 置于一70℃冰箱保存。另 10例正常肝组织取 自肝 内胆管 的预后指标，PAK6可能与肝癌的发生、发展密切相关。 结石手术切除患者。所有标本获取均征得患者及家属同意， 关键词 ：肝肿瘤；肝细胞癌；p21活化蛋白激酶6；预后 并通过医院伦理委员会批准。 中图分类号：R735．7 文献标志码：B 1．2 Westernblot法 分别称取一70℃保存的HCC及癌 文章编号：1001—7399(2014)03—0313—05 旁正常组织 100mg，置于匀浆器中，加入适量蛋白裂解液及 doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2014．03．022 蛋白酶抑制剂，冰浴下制成匀浆，4℃ 12000r／min离心 15 min，上清液进行蛋 白定量，绘制标准蛋白曲线。然后进行 肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma，HCC)是世界第五大 SDS一聚丙烯酰胺凝胶 ，每孔加入等量蛋白样品，电泳后湿 常见癌症，且是全球第三大癌症死因 ，全球每年约有70万 转至PVDF膜上。用脱脂牛奶封闭后加入多克隆兔抗 PAK6 患者死于HCC_2j。我国是 HCC高发区之一，每年有超过37