小儿神经母细胞瘤D2-40与CD56双重免疫组化染色分析.pdfVIP

· 1258 · 临床与实验病理学杂志 Jc2 ExpPathol2011Nov；27(11) 小儿神经母细胞瘤 D2—40与CD56双重免疫 组化染色分析 曾荣新，夏健清，曹 毅，李丽萍，牛会林 关键词：神经母细胞瘤；双重免疫组化染色；D240；CD56 1．1 材料 收集2002～2010年广州市妇女儿童医疗中心 中图分类号：R446．8；R739．4 文献标识码：B 外科手术及活检神经母细胞瘤41例，挑选病理科存档蜡块 ， 文章编号：1001—7399(2011)11—1258—02 复诊 HE染色切片，重新按国际神经母细胞瘤病理学 (INPC 2003)进行分型。所有病例术前均未行化疗 ，免疫组化染色 神经母细胞瘤是d,JL最常见的颅外实体瘤 ，其内有淋巴 抗体D240、CD56及即用型快捷免疫组化 MaxVision二抗试 管生成的研究在小儿神经母细胞瘤 的文献中少有报道 。 由于淋巴管内皮细胞特异性抗体 D240的广泛应用 ，使区分 剂盒均购 自福州迈新公司。 血管与淋巴管成为可能。本文应用 D2_40与CD56双重免疫 1．2 方法 石蜡组织4 m厚切片，脱蜡至水。高压热修 组化染色法 ，探讨d,JL神经母细胞瘤中淋巴管生成的意义。 复：取一定量的柠檬酸盐缓冲液 (pH6．0)于高压锅中，放在 电磁炉上加热至沸腾，将水化后的组织切片置于切片架上 ， 1 材料与方法 放入缓冲液中，高压锅喷气计时 1min后冷却至室温 ，取 出 切片蒸馏水冲洗2次，PBS洗 3次 ×5rain。3％ H2O：室温 孵育 10rain，PBS洗 3次 ×5rain。血清封闭10rain，滴加一 收稿 日期：2011—03—03 基金项 目：广州市医药卫生科技 (2009一YB~83) 抗D240(1：50)，室温孵育 1h，PBS洗 3次 X5rain。滴加 作者单位：广州市妇女儿童医疗中心病理科 510623 二抗室温孵育 15rain，PBS洗 3次 ×5rain。DAB显色，显微 作者简介：曾荣新，男，主管技师。Tel：(020E-mail：mng)-【 镜下控制 阳性细胞呈棕色为止，蒸馏水 2次 ×5rain。 inzeng811@ gmail．eom 0．05％盐酸(pH2．0)洗脱 ，室温孵育30rain，充分水洗 ，PBS 牛会林，女，主治医师，通讯作者。E-mail：hlinniu@gmail． 洗 3次X5min。第2次染色，滴加CD56(即用型)室温孵育 n m 1h，PBS洗3次 ×5min。滴加二抗室温孵育 15rain，PBS洗 冷冻切片的原理是通过低温使组织中的水分快速结成 位细胞重叠较多，在镜下细胞结构不清楚。封片时由于组织 微小冰晶，细小的冰晶使整个组织具有一定的硬度 ，可以像 不在一个平面上 ，常有气泡形成，或者树胶达不到组织边缘。 石蜡或树脂包埋的组织一样，切出可供诊断的切片。脂肪组 而用切片的方式制作的脂肪切片，细胞分布均匀 ，厚薄均一， 织由脂肪细胞和极少的结缔组织构成，疏松结缔组织将脂肪 镜下组织结构基本完整 ，细胞形态清晰 ，便于镜检诊断。 组织成分割成脂肪小叶，脂肪小叶由大量群集的脂肪细胞构 脂肪组织的冷冻切片一直是病理技术人员思考的问题 ， 成 ，脂滴 占据了整个脂肪细胞的大部分 ，脂肪细胞几乎不含 我们不能拘泥于常规 ，在实践中要不断摸索、创新，善